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基础医学实验教学中心机能学教案
目录
Contents
新乡医学院实验课教案首页(医学机能学)....................................
...2
新乡医学院实验课教案首页(生理学)..............................................63
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新乡医学院实验课教案首页(医学
能学)
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:刘国庆 助教
一 题目 机能学动物实验基本操作和实验性肺水肿
二 对象 2004级本科各个专业
三 课时目标
与课时分配
1.理论讲解1学时;
2.学生操作4学时;
四 授课重点
1.实验动物的概念及其特点;
2.小鼠的腹腔注射,灌胃和肌肉注射方法;
3.家兔耳缘静脉注射麻醉和气管,静脉的分离和插管;
4.肺水肿发生的机制;
五 授课难点
1.家兔耳缘静脉注射麻醉;
2.静脉分离及插管;
3.取肺方法,肺水肿的发生机制;
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与课前准备
教师讲解,学生操作,师生共同讨论;
课前认真备课,查阅相关资料,认真书写教案;
八 教材与
参考文献
教材:刘巨源主编.医学机能学实验指导,人民卫生出版社,2004
1.金惠铭等主编.病理生理学,人民卫生出版社,2004
九 思考题
1.家兔,小鼠的生物学特性主要有哪些
2.家兔耳缘静脉注射麻醉要注意哪些问题
3.分离静脉和静脉插管要注意什么
4.实验中家兔发生肺水肿的机制是什么
十 教研室审查意见 主任签字
3
物实验的基本操作和实验性肺水肿
一,目的:
1.熟悉机能学,掌握实验动物的基本概念和特点,熟悉常用实验动物的生物
学特性和机能学常用手术器械;
2.初步掌握机能学实验常见的基本操作;
3.学习肺水肿动物模型的复制方法,观察肺水肿的表现,并分析其发病机制;
二,机能学:是将生理学,病理生理学与药理学三门学科的实验课有机融合
而成的一门新的综合性课程.
三,实验动物与实验用动物:
实验动物是根据科学研究的需要,定向培育而成的,供科学实验需要的对象
和材料.它必须有明确的生物学特征和清楚的遗传背景,并经微生物控制和特定
环境下驯化培育.
实验用动物通常指用于实验的各种动物,它包括实验动物,家禽(畜)和野
生动物.其中一些实验动物可能出于某些受试动物敏感性或操作技术上的需要,
但现阶段尚不可能完全达到实验动物的实验要求.
四,常用试验动物的生物学特性:
一般实验动物进化程度愈高,其功能,代谢,结构愈复杂,反应愈接近人类.
一青蛙和蟾蜍:属于两栖纲,无尾目;离体组织器官生存要求条件低,可用
于离体实验.如:坐骨神经-腓肠肌标本实验,蛙心灌流实验.
二小白鼠:属于哺乳纲,啮齿目,鼠科.1.繁殖周期短,量大,生长快,适
宜做大批动物实验;2.用于避孕药物及畸胎学等研究.
三家兔:属于哺乳纲,啮齿目,兔科.1.耳缘静脉表浅,易暴露,常用于药
物注射部位和止血药物研究;2.减压神经自成一束,可用于研究减压反射.
四大白鼠:属于哺乳纲,啮齿目,鼠科.1.实验模型稳定,价格合理,用途
较广;2.缺少化功能.3.踝关节做抗炎药物的研究.
五其它:豚鼠,猫,狗等
五,实验动物基本操作
(一)小白鼠
1.抓取:①右手捉鼠尾,放于笼盖上或粗糙面上.②轻拉鼠尾向后,使其紧
伏在笼面,起固定作用.③左手拇指,食指沿其背向前捏住颈部皮肤.④左手小
指及掌部固定其尾部
2.肌肉注射:操作时两人配合,一人抓取动物,右手拉直动物下肢,另一人
进行注射,每次药量不超过0.1ml .(小鼠肌肉很少,一般不采用肌肉注射给药,
实际是注射在后腿肌和股四头肌上,易损伤坐骨神经).
3.腹腔注射:左手正确捉持动物,鼠头略朝下,右手持注射器穿刺,部位在
腹白线偏左的下腹部.针头刺入皮肤后进针 3mm 左右,接着使注射针与皮肤面呈
45
.
角刺入腹肌,当有落空感即进入腹腔,回抽无肠液,尿液后即可注射.每次注
射量0.1-0.2ml/10g体重.
4.灌胃法:左手正确捉持动物,右手持灌胃器,先用灌胃针比测由小鼠唇部
到最后一肋的长度,再从小鼠口角插入口腔内,然后用灌胃针头沿上颚壁轻轻插
入食管.当稍感抵抗时,此位置相当于食管通过膈肌部位(1/2 灌胃针头长),此
位可推注.(动物安静,呼吸无异常时,才可将药物注入.反复几次不能成功,要
考虑换小针头,以防强行进针刺破食管而使动物死亡).
导入新课,概述本
次实验内容
简单介绍常用试验
动物的生物学特性
重点讲解实验动物
基本操作
进行示教,强调正
确的灌胃方法
4
5.小白鼠:颈椎脱臼法:左手拇指和食指按住头部,右手用力向后拉尾巴,使
脊髓与延髓脱臼,动物立即死亡.
(二)兔(家兔实验性肺水肿)
1.抓取:右手抓住其颈部皮肤轻轻提起,左手迅速托拄其臀部
2.兔耳缘静脉麻醉:耳缘静脉位于耳背面外侧缘,拔去兔毛(用手轻弹,或用
水湿润局部),使静脉血管充盈,扩张,便于穿刺进针.左手拇指和无名指固定兔
耳远端,食指和中指捏住近心端,右手持注射器,以15 ~20 角刺入血管(尽量从
远心端开始),当回抽有血或阻力小时,可推进注射器.
注意:麻醉速度,剂量(氨基甲酸乙酯1g/kg),随时检查深浅反射.
3.固定:四肢夹于兔台四个兔夹上,细线挂其门牙固定头部.
4.颈部手术操作
⑴剪毛:粗剪刀压着皮肤,逆毛发生长放向剪,兔毛放置于盛水的兔毛缸内,
剪毛区要大于手术区.
⑵暴露气管:手扪及甲状软骨,用剪刀切开皮肤约6~7cm长(上起甲状软骨,
下达胸骨上缘).切开皮下,钝性分离肌肉, 注意避开血管,以免造成大出血.
⑶气管插管:气管充分暴露后,穿线备用,在甲状软骨下第3,4环状软骨之
间做一横形切口(1/3-1/2气管周长),再向上做一纵形切口,使成倒"T"字形.
气管插管斜面向下,从切口处向肺脏方向插入,用棉线结扎固定,并用线的残端
扎于气管插管分叉处,以防脱落.
⑷分离右侧颈外静脉并插管:左手食指及拇指捏住切口右侧皮肤,将皮下浅层
肌肉向内侧轻拉,可看到右侧颈外静脉,用玻璃分针或止血钳将其分离出来1-2cm,
穿两线备用,先用动脉夹夹闭静脉近心端,待静脉充盈后再结扎远心端,在静脉
上靠近远心端结扎线处有眼科剪呈 45 度剪一小口(1/3-1/2 血管周长),将事先
与输液管和输液瓶连接好并充满生理盐水的插管插入,结扎和二次结扎固定好.
⑸输液:
缓慢输液:输液速度5―10滴/分,目的保持输液管通畅,恢复家兔生理状态,
同时进行观察,时间:5分钟,待家兔恢复以后观察家兔各项指标
快速输液:输液速度180―200滴/分,输液量100ml/kg.
注意:实验组待快速输液即将结束的时候滴加 0.1‰肾上腺素 1mg/kg,促进
肺水肿的发生,而对照组不加肾上腺素.
⑹.观察:密切观察家兔各项指标,当听到肺部湿0音或者气管插管处出现粉
红色泡沫时,提示家兔已出现肺水肿.
⑺处死:当肺部出现湿0音或者气管插管处出现粉红色泡沫时,止血钳夹闭家
兔气管处死家兔.
⑻取肺:止血钳夹闭家兔气管,从剑突处自下往上剪开皮肤,打开胸腔暴露肺
脏,小心分离心脏和肺,与左右肺门处结扎,在结扎线上方剪断并小心游离气管
支气管和肺.
⑼计算肺系数:取出肺之后用滤纸将肺表面水分吸干,秤出肺重
肺系数=肺重/体重 (家兔正常为4--5)
六,注意事项
1.耳缘静脉注射麻醉时,穿刺手法要正确,推注药物时注意检查浅深反射.
2.实验组与对照组的输液速度要保持一致便于观察.
3.第一次加肾上腺素后效果不明显可以重复滴加,两次时间间隔15min.
4.取肺的时候要夹闭器官,不要挤压肺,更不要损伤肺,防止水肿液外流影
重点讲解耳缘静脉
麻醉和静脉插管
介绍观察项目:呼
吸(频率,节律,
幅度),气管分泌
物,肺部听诊
观察各指标时注意
和对照组比较
取肺的时候要夹闭
器官,不要挤压肺,
不要损伤肺
再次强调注意事项
5
响肺系数的测定.
七,结果分析
本次实验中家兔肺水肿的发生机制主要有:
1.毛细血管流体静压增高
正常肺毛细血管流体静压平均为0.933kPa(7mmHg),当其增至3.33～4.00kPa
(25～30mmHg)时,因淋巴回流代偿性增多,故仍不致出现水肿.只有当急骤上
升超过此水平,才能引起间质性水肿并继而发展成为肺泡水肿.肺毛细血管流体
静压过高,有可能使内皮被过度牵张而致破裂,或引起内皮细胞连接部裂隙增大,
出现继发性通透性增高,但一般要达到6.67kPa(50mmHg)才有可能出现这种情况.
2.血浆胶体渗透压下降
输入过多不含胶体物质的液体稀释了血浆中的蛋白质,使血浆胶体渗透压↓.
3.去甲肾上腺素的作用
肾上腺素可引起体循环外周阻力增高,大量血液从体循环转移到肺循环,而
左心未能及时适应,引起肺毛细血管静水压明显上升,肺血管内液体渗入肺间质
和肺泡,发生肺水肿
本实验开始都是大量快速滴生理盐水,每只兔都是 200ml 以上的注入量,这
样血容量肯定是明显升高胶体渗透压减低,从各实验组观察,这时的各只兔子呼
吸都是从开始的均匀平稳到加深加快,而听诊则闻及其呼吸音增强,心跳明显加
快,由此反映了血容量升高,兔的心跳加快,呼吸加深加快.
实验结束时对结果
进行分析并简要总
结
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新乡医学院实验课教案首页
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范讲师
一 题目 机能学动物实验基本操作
二 对象 2003级本科各个专业
三 课时目标
与课时分配
1.理论讲解2学时
2.学生操作8学时
四 授课重点
5.最适前后负荷的确定
6.蛙心灌流装置的应用
7.主动脉和下腔静脉的分离与动,静脉插管术
五 授课难点 主动脉和下腔静脉的分离与动,静脉插管术
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与课前准备
教师讲解,学生操作,师生共同讨论;
课前认真备课,查阅相关资料,认真书写教案;
八 参考书
刘巨源主编.医学机能学实验指导,人民卫生出版社,2004
金惠铭等主编.病理生理学,人民卫生出版社,2004
金有豫主编.药理学,人民卫生出版社,2001
九 思考题
5.牛蛙心脏的结构特征有哪些
6.分离牛蛙心脏主动脉和下腔静脉需要注意哪些问题
7.本次实验各步骤需要要注意哪些问题
十 教研室审查意见 主任签字
新乡医学院 药理学 教研室 2006年10月14
7
日
新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范 讲师
基本内容
教学手段和
教学组织
影响心功能的因素及实验性心力衰竭的发生与治疗
一,目的:
1. 学习离体在位心脏恒压灌注方法;
2. 观察影响心功能的各种因素;
3. 学习制备实验性心力衰竭的动物模型;
4. 设计抢救方案并掌握心衰药物作用机制.
二 实验原理
一 评价泵功能的指标
心脏最重要的功能是泵血功能,评价泵功能的指标有心输出量(每分输出量,
minute volume,cardiac output):一侧心室每分钟射出的血液量;
搏出量(stroke volume):一次心搏中由一侧心室射出的血液量;
射血分数(ejection fraction):搏出量/心室舒张末期容积×100%
心指数(cardiac index):单位体表面积计算的心输出量;
每搏功(stroke work):心脏一次收缩所作的功;
每分功(minute work):心室每分钟所作的功.
其中,每搏功,每分功更能反映心脏的泵功能,它们的计算简式为:
每搏功(g.m)=搏出量×1/1000×(平均动脉压-平均心房压)×13.6
每分功(Kg.m/min)=每搏功×心率×1/1000
二 心输出量的调节
由于心输出量等于搏出量乘以心率,这次实验主要从搏出量,心率这方面来观
察心输出量的影响因素.
⒈ 心率对心输出量的影响
在一定范围内,心率的增加可使心输出量相应增加.当心率超过 180 次/分或
低于 40 次/分时,由于受到心肌能量供应和心脏舒张期长短的影响,导致心输出
量反而下降.
2. 搏出量对心输出量的调节
心脏的搏出量取决于前负荷(心肌初长度或心室舒张末期容积或充盈压),心
肌收缩能力以及后负荷的影响.
⑴ 前负荷对搏出量的调节
前负荷就是心肌初长度或心室舒张末期容积.
Starling机制:回心血量增加,心脏在舒张期充盈就增加,心肌受牵拉就愈大,
则心室的收缩力量增强,搏出到主动脉的血量愈多.所以, Starling 机制主要保持
心搏出量和回心血量相平衡.
导入新课,概述本
次实验内容
结合生理学和药理
学所学内容简单介
绍本次实验的原理
8
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新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范 讲师
基本内容
教学手段和
教学组织
余血量增加,通过自身调节机制可使搏出量恢复正常;随着搏出量的恢复,心
室舒张末期容积也恢复到原来水平.
三 药物性心衰的机制
所用到的药物是2×10-6～10-5mol/L的GrSO4;其机制为:Gr2+与Ca2+竞争钙通
道,这样,一方面降低工作细胞内 Ca2+浓度,引起心肌收缩力下降;另一方面,
也影响到窦房结细胞的自动去极,导致心律失常,使心衰进一步加重.
四 心衰时心脏的代偿反应及临床表现
心脏的代偿反应:①加快心率 在一定范围内的心率加快可提高心输出量,对
维持动脉血压,保证心脑的灌流量.②心脏扩张 在正常情况下,心肌肌小节的
初长度未达到最适长度,因此,心室还有进一步扩张的余地,使之达到最适长度,
以增强心肌收缩力,增加心输出量.③心肌肥大 肥大的心肌可在两方面发挥代
偿作用:一是可以增加心肌的收缩力,有助于维持心输出量;二是降低室壁张力,
降低心肌耗氧量,有助于减轻心脏负担.
临床表现:当左心衰竭时,可引起不同程度的肺循环充血,主要表现为各种形
式的呼吸困难和肺水肿;当心衰发展到全心衰竭或右心衰竭时,主要表现为体循
环静脉系统过度充盈,静脉淤血,压力增高,内脏器官充血,水肿.当心衰失去
代偿能力,此时心脏的功能储备将消耗殆尽,心输出量开始明显下降,出现一系
列外周血流灌注不足的症状如皮肤苍白或发绀,疲乏无力,失眠,嗜睡,尿量减
少;当出现急性,严重心力衰竭时,由于心输出量急剧减少,动脉血压也随之下
降,组织的灌流量显著减少,机体还会发生心源性休克.
五 心衰的治疗
心衰的治疗主要从以三方面着手:第一,防治基本病因,消除诱因;第二,改
善心脏舒缩功能;第三,减轻心脏前,后负荷.这次实验就根据以上三方面,观
察普萘洛尔,异丙肾上腺素及西地兰治疗心衰的机制.
三 实验对象 牛蛙
原因:牛蛙属于两栖纲无尾目动物,由于较低等,所以其离体组织器官对外界
环境的要求不高,能够长时间地保持较高的生理活性.
四 实验器械及药品
恒压灌注装置 量筒 大烧杯(2个) 小烧杯(1个) 蛙类手术器械一套
(金属探针,粗剪刀,镊子,玻璃分针,蛙板,组织剪,眼科剪)
任氏液 硫酸铬任氏液 1/万NA 1/万Ach 普萘洛尔 异丙肾上腺素
西地兰
五 实验步骤
一 恒压灌流装置准备
贮液瓶与左侧纵管构成连通器,贮液瓶中液面高度由左侧纵管中的液柱读取.
由于与左侧纵管相连的塑料管插入静脉中,纵管的高度代表前负荷的大小.实验
前贮液瓶中注入一半容积以上的任氏液,同时把液柱固定在 5cm 高度,调节静脉
插管中液体流速为 20～30 滴/分,以后,我们就不要再动止水夹;那么我们就可
重点讲解急性心衰
模型的制作以及心
衰的表现
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新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范 讲师
基本内容
教学手段和
教学组织
以通过改变贮液瓶的高度来改变前负荷的大小.右侧是侧管,与侧管相连的塑料
管插入到动脉中,因此,侧管的高度代表不同的后负荷;在实验过程中,通过打
开不同高度的止水夹来改变后负荷的大小.
在这里,大家特别需要清楚这一点:这次实验,我们就是利用恒压灌注装置
给心脏营造一个体外循环系统,从而来观察心输出量的影响因素;与纵管相连的
塑料管相当于静脉系统,与侧管相连的塑料管相当于动脉系统,任氏液相当于血
液.
二 制备离体在位牛蛙心脏的灌流标本
1. 取牛蛙一只,破坏其脑和脊髓.
标志:下颌呼吸运动消失,各种反射消失,四肢松软,有时会出现尿失禁现
象.
2. 暴露心脏.
在剪开心包膜的时候,注意分清心包膜与血管壁.
3. 分离左,右主动脉,并穿3根线备用.
第1根线穿在左主动脉下方,第2根线穿在右主动脉下方,第3根线穿在主
动脉干下方.
4. 分离下腔静脉,并在其下穿第4根线,结扎线3.
把蟾蜍心脏翻向头端,仔细辨认静脉窦,下腔静脉及其下的三个肝静脉分支.
接着,分离好下腔静脉,并在其下穿第4根线;将第3根线的一端从下腔静
脉下穿出,结扎之,注意结扎位置应靠下,以免结扎静脉窦.
5. 分离肝左静脉,做静脉插管,结扎线4.
分离肝左静脉约4～5mm,用眼科剪在肝左静脉上做一小切口,将静脉插管从
切口处插入下腔静脉,并用第 4 根线结扎固定,这样,流回心脏的液体通道
只有静脉插管.
6. 结扎线2,做动脉插管,结扎线1.
将心脏翻回原来的位置,通过第 2 根线结扎右主动脉,并在左主动脉上做一
小切口;那么,随着心脏的舒缩活动,切口一张一合,并有血液流出;待切
口中流出清亮的任氏液时,将动脉插管插入到左主动脉,用第 1 根线结扎固
定.这样,流出心脏的液体通道只有动脉插管.
三 实验观察及记录
有几点需要特别注意:
1. 每改变一个观测项目时,需先让心脏稳定一段时间后,再进行下一步记录.
2. 直接在心脏表面滴加NA或ACh均为5～6滴,停5分钟后再进行观察记录,
观测完毕后,必须用大量的任氏液将心脏表面的药物冲洗干净.
3. 每搏功=搏出量×后负荷高度
4. 复制心衰模型时,必须用铬任氏液灌注15分钟后,再进行观察记录.
5. 进行药物救治时,用正常任氏液灌注.
6. 每小组只用一种药物救治,切不可用两种或两种以上的药物救治.
强调蛙心分离过程
中的注意事项
简单总结
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课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范 讲师
基本内容
教学手段和
教学组织
实验项目的观察及操作均按下表进行:
实验项目 心率 心输出量 搏出量 每搏功 每分功
5
后 前 10
负5负 15
荷 荷 20
25
5
前 后10
负5负15
荷 荷20
25
NA 5
前 后10
负5负15
荷 荷20
ACh 5
前 后10
负5负15
荷 荷20
25
铬任氏液 5
前 后 10
负5负 15
荷 荷 20
25
任氏液 5
前 前 10
负5负 15
荷 荷 20
25
六 实验结果及分析
待实验结束后,结合具体的数据进行具体的分析.
七 注意事项
1. 保护好蟾蜍的心脏,及时在心脏表面滴加任氏液.
2. 实验过程中,一定要保持各管道通畅.
3. 切勿损伤静脉窦.
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新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:海广范 讲师
基本内容
教学手段和
教学组织
13
新乡医学院实验课教案首页
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:詹合琴 副教
授
一 题目 磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定
二 对象 2004级本科各个专业
三 课时目标
与课时分配
1.理论讲解1学时
2.学生操作4学时
四 授课重点
8.颈部手术操作
9.各时间点取血样
10. 各比色管的配制
五 授课难点 各比色管的配制,半衰期的计算
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与课前准备
教师讲解,学生操作,在实验过程中教师答疑解难,悉心指导.
课前查阅相关资料,认真备课,认真书写教案;做好预实验工作.
八 参考书
刘巨源主编.医学机能学实验指导,人民卫生出版社,2004
杨宝峰主编.药理学,人民卫生出版社,2003
九 思考题
8.本实验为什么要给予动物肝素
9.测定半衰期有何意义
10. 分离血管,神经要注意什么
11. 配制各比色管时要注意什么
十 教研室审查意见 主任签字
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新乡医学院 药理 教研室 2006年9月28日
新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:詹合琴 副教授
基本内容
教学手段和
教学组织
磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定
一,目的:
了解磺胺类药物在动物体内随时间变化的代谢规律;掌握血药浓度的测定方
法;了解Vd和CL的计算及意义.
二,实验原理:
(一)多数药物在体内按一级动力学规律消除,体内药物按瞬时血药浓度以
恒定的比值进行消除,半衰期恒定(t1/2=0.693/Ke ).从公式可以看出,只要求
出 Ke 便可求出半衰期.
Ke=
血浆中磺胺药浓度 = 0 测定管光密度(给药后-给药前)
(二)呈色原理
1.重氮反应:磺胺嘧啶钠(NaSD)+亚硝酸钠(NaNH2)生成重氮盐
2.偶联反应:重氮盐+ 麝香草酚形成偶氮化合物(橙红色)
3.酸性环境:用7.5%的三氯醋酸
4.碱性环境:用0.5%的麝香草酚
三,器材和药品(略)
四,实验方法
(一)取家兔一只,称重,麻醉(20%乌拉坦ml/kg),
(二)颈部手术,分离颈总动脉后耳缘静注肝素(原注射液稀释10倍)2.5ml
0只.
(三)颈动脉插管取血样.给药前取血 2ml, 给药后 10min 及 40min 各取血
2ml.
(四)测定液配制 将上述血液各0.2ml缓慢加入盛有三氯醋酸5.8ml试管
内,离心待用.
(五)标准液配制 将0.02%SD - Na0.2ml缓慢加入盛有三氯醋酸5.8ml试
管内.按下面比色管配制表配制各比色管,进行比色.
(六)记录比色结果,进行计算.
(七)7)分析和回顾实验过程,书写实验报告.
导入新课,复习半
衰期的概念和意
义.
简单介绍呈色原理
和分光光度计.
分步讲解操作方
法,必要时进行示
范操作.
LogC1- logCt
t
02.303
标准管浓度
标准管光密
度
15
新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:詹合琴 副教授
基本内容
教学手段和
教学组织
各比色管的配制
成分 空白管
(ml)
标准管
(ml)
测 定 管(ml)
给药前 给药后30min 给药后30min
测定液 / / 1.5 1.5 1.5
标准液 / 1.5 / / /
蒸馏水 1.5 / / / /
0.5%NaNO2 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
0.5%麝香草酚 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
五,注意事项
(一)各吸管不能混用.
(二)比色杯手指只能接触毛玻璃面.
(三)离心时要注意平衡.
(四)加样顺序不能颠倒
(五)取血样时注意用肝素润洗试管
(六)动物基本操作要规范
(七)比色时比色杯要匹配.
(八)实验完毕后注意打扫卫生,物品归位.
六,检查实验结果,进行总结分析.
强调各注意事项的
重要性.举例说明
违反操作规程时所
造成的后果.
对各组实验结果进
行检查核对,然后
进行总结分析,指
出不足之处.
16
新乡医学院实验课教案首页
课程名称:机能实验学 授课教师姓名及职称:贺丹
一,题目 呼吸运动的调节与实验性的急性呼吸衰竭
二,对象 2004级本科各个专业
三,单元教学目标与
课时分配
1.理论讲解2学时:80min
2.学生操作8学时:320min
共:400min
四,授课重点 呼吸运动调节方式及呼吸衰竭
五,授课难点
11. 呼衰标本制备.
12. 白细胞计数.
13. 灌洗液中蛋白量的测定.
六,授课形式 小班实验课
七,授课方法与课前
准备
认真备课;
采用启发式教学;
了解学生已学课程,医学生物学,生物化学,同期课程生理学内容
围绕重点,难点,深入浅出
八,教材与参考文献
《麻醉生理学》《生理学》第五版
《生理学实验方法》李东亮主编
《医用机能实验学》常全忠主编
《病理生理学》第五版
《病理生理学实验》孙银平主编
《药理学》第五版
九,思考题
1.呼吸运动的调节.
2.肺水肿型急性呼吸衰竭的发病机制.
十,教研室审查意见 主任签字
新乡医学院生理学与神经生物学教研室 2006年 11月 1日
17
呼吸运动的调节与实验性的急性呼吸衰竭
一 实验目的:
1. 观察神经因素和其他因素对呼吸运动的影响以及膈神经的放电
情况.
2. 复制油酸性急性肺水肿的动物模型.
3. 初步探讨肺水肿性的呼吸衰竭的发病机制.
二 实验原理:
呼吸运动的调节:
1. 呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映.呼吸运动中枢主要包
括延髓和脑桥,由它们发放神经冲动,通过传出神经(膈神经,
肋间神经)支配呼吸肌收缩 ,胸廓的扩张,胸内压的降低,
气体通过呼吸道进入肺泡,进行气体的交换来完成呼吸运动.
2. 节律性的呼吸运动虽然起源于脑,但是可受来自呼吸器官本身
以及血液循环等其他器官感受器传入冲动的反射性调节.
呼吸的反射性调节:
1)肺牵张反射 2)化学感受性反射
3)呼吸肌的本体感受性反射 4)防御反射
肺牵张反射:指由肺扩张或肺萎缩引起吸气抑制或兴奋的
反射.它包括肺扩张反射和肺萎缩反射.
当吸气时―-肺充气,扩张---气管到细支气管平滑肌内的感
受器兴奋---冲动经迷走神经传到延髓---吸气停止,转入呼
气.
18
(肺萎缩时的肺萎缩反射将起作用,使呼气转为吸气)
化学感受性呼吸反射:
分为 1.外周化学感受性反射:
感受器:颈动脉体 主动脉体 化学刺激:动脉血中 PO2
PCO2 H+
2.中枢化学感受性反射:
感受器:延髓腹外侧浅表部位 化学刺激:脑脊液或局部
组织中的H+
呼吸衰竭:
1. 定义:指的是由于外呼吸功能的严重障碍,以致动脉血氧分压
低于正常范围,伴有或不伴有二氧化碳分压增加的病理过程.
2. 发病原因:(1)肺通气功能障:
1 限制性通气不足:吸气时肺泡扩张受限所致肺
泡通气不足.
2 阻塞性通气不足:气道狭窄或阻塞所致通气
碍.
(2) 弥散障碍;(1)肺泡膜的面积减少 (2)肺膜
的厚度增加
(3) 通气/血流比值:
三 实验对象:家兔
四 实验器材和药品:
器材;生物信号采集系统,计算机,张力换能器,哺乳动物手
19
术器械1套,生物电引导电极,兔台,气管插管,注射器,50CM
长橡胶管,显微镜,白细胞计数板,钠石灰
药品:20%乌拉坦,考马斯亮蓝试剂,蛋白标准液,油酸,尼
可刹米,乳酸,生理盐水,白细胞稀释液
五 实验步骤:
一)动物准备:
1.抓取(正确抓取方法) 2.称重
3. 麻醉(20% 乌拉坦 5ml/kg):1)家兔耳缘静脉,远心端注射;
2)注射速度要慢,同时要观察家兔的角膜反射和夹趾反射 ;
3)注射时注射针头针尖斜面要和针管刻度保持一致,便于观
察注射药物的剂量.
4. 固定
5. 气管插管:先判断家兔甲状软骨位置,在其下切一个5-6CM的
切口,再用止血钳钝性分离肌肉暴露气管,并在气管下穿一根
棉线备用.在气管 3―4 气管软骨环的位置剪一个为周径 1/3
―1/2的"倒T字型"的切口,在插气管插管时尖端斜面先向
下,插入后再向上并结扎,同时也要在气管插管上结扎,防止
其脱落.
6. 剑突下切口,暴露其下的小膈肌.
先摸清家兔剑突位置,在剑突下1CM的位置剪一个1CM的
切口,完全暴露剑突后在其下面找到两侧的小膈肌.
二)连接装置:
20
1.进入生物信号采集系统
2.张力换能器挂到剑突上-----选择"输入信号"1通道"张力"
―呼吸运动
3.生物电引导电极连到小膈肌上---选择"输入信号"2通道"神
经放电"―--膈神经放电
4.通道1 G 100-1000 T 0.1 F 3HZ V 1.28
5.通道2 G 10000 T 0.01 F 1000HZ V 320
三)观察:呼吸幅度和频率(通用信息显示区:频率和峰峰值)
1. 正常呼吸:
2. CO2:气管插管一侧夹闭,另一侧连接一个盛有 CO2 的气囊来
观察.
3. 缺氧;气管插管一侧夹闭,另一侧连一个盛有钠石灰的气囊,
使充气后随家兔呼吸CO2被吸收而造成缺氧来观察.
4. 增大无效腔;气管插管一侧夹闭,另一侧连接一个长约 50CM
的橡皮管观察.
5. 气管狭窄;气管插管一侧夹闭,另一侧用止血钳夹闭其周径2/3
观察.
6. 窒息;夹闭两侧的气管插管观察.
7. 乳酸:耳缘静脉注射0.5ML乳酸来观察.
8. 尼可刹米;耳缘静脉注射0.5ML来观察.
四)实验性的急性呼吸衰竭:
1. 实验组:
21
耳缘静脉注射油酸(0.3ml/kg 注射速度0.1ml/min 要均匀,
缓慢!!)---30分钟后再注 0.2ml---观察呼吸情况---30-60
分钟肺水肿(呼吸浅快,粉红色泡沫液体)---耳缘静脉采血,
白细胞计数(20微升血液+0.38毫升白细胞稀释液)--处死---
取肺---称重,求肺系数---灌洗(10毫升生理盐水,150毫升
空气)---抽灌洗液3-4毫升计算蛋白量,白细胞计数
2. 对照组:
同实验组,只是直接从耳缘静脉采血开始以下实验步骤.
六 实验结果
肺水肿型急性呼吸衰竭:
肺系数 外周血白细胞数 灌洗液白细胞数 灌洗液蛋白浓度
1.实验组:10.73 40*50=2000 180*50=9000
0.18/0.04*50=2250
2.对照组:4.72 8050 600
0.005/0.015*50=16.67
七 结果分析
肺水肿型急性呼吸衰竭;
油酸注射后,使外周血中大量的白细胞聚集在肺部,同时释放氧
自由基,蛋白酶,炎症介质等物质,使肺部毛细血管内皮细胞损伤,
通透性增加,大量的水,血浆蛋白,血细胞进入肺组织间隙和肺泡内,
造成肺水肿.所以实验组外周血中的白细胞少,灌洗液中的白细胞和
22
蛋白要多,肺系数大,而对照组中的外周血中的白细胞多,灌洗液中
的白细胞和蛋白要少,肺系数要小.
呼吸运动的调节
1. CO2:CO2的增多,导致肺内Pco2的升高,使肺泡内与肺毛
细血管中的二氧化碳分压差减小,动脉血中的二氧化碳的分
压增大,从而刺激化学感受器使呼吸加深加快.
2. 缺氧:缺氧时,导致肺内氧分压的降低,从而肺泡内与肺毛
细血管中的氧分压差的减小,动脉血中氧分压减小,刺激外
周化学感受器使呼吸加深加快.
(注:有时出现呼吸频率的下降,是因为当缺氧持续一段时
间后,动脉血中的二氧化碳分压升高超过一定范围时会出现
二氧化碳的的麻醉作用,即对呼吸中枢不起兴奋作用而是抑
制作用,造成呼吸频率的下降.)
3. 增大无效腔:无效腔的增大造成动脉血中的氧分压的降低,
二氧化碳分压的升高,刺激化学感受器,从而使呼吸加深加
快.
4. 气管狭窄,窒息:造成动脉血中的氧分压的降低,二氧化碳
分压的升高,刺激化学感受器,从而使呼吸加深加快.
(注:有时出现呼吸频率的下降,是因为家兔对肺牵张反
射很敏感,当气管狭窄和窒息时气道阻力增加时,肺扩张受
限,使吸气呼气切换机制作用延迟,吸气相时间延长,同时
肺萎陷时间也延迟,呼气时间延长,从而导致一次呼吸时间
23
延长,呼吸频率的下降.
5. 乳酸:注射乳酸后增加动脉血中的H+的浓度,从而刺激化学
感受器,从而使呼吸加深加快.
6. 尼可刹米:为呼吸中枢兴奋性药物,使呼吸加深加快.
24
新乡医学院实验课教案首页
课程名称:机能实验学 授课教师姓名及职称:白瑞樱
一,题目 肾脏的泌尿功能及急性肾功能不全
二,对象 2004级本科各个专业
三,单元教学目标
与课时分配
1.理论讲解2学时:80min
2.学生操作8学时:320min
共:400min
四,授课重点 影响尿生成的因素,判断肾衰的指标及实验方法.
五,授课难点
1.分析影响尿生成的因素.
2.肾衰的发生机制及治疗.
六,授课形式 小班实验课
七,授课方法与课
前准备
认真备课;
采用启发式教学;
了解学生已学课程,医学生物学,生物化学,同期课程生理学内容
围绕重点,难点,深入浅出
八,教材与参考文
献
《麻醉生理学》《生理学》第五版
《生理学实验方法》李东亮主编
《医用机能实验学》常全忠主编
《病理生理学》第五版
《病理生理学实验》孙银平主编
《药理学》第五版
九,思考题
1.影响尿生成的因素有哪些
2.HgCl2引起急性肾功能不全的发病机制
3.速尿治疗急性肾功能不全的机制
十,教研室审查意见 主任签字
新乡医学院 生理学 教研室 2006年 11月 1日
25
肾脏的泌尿功能与急性肾功能不全
[实验目的]
1.观察神经体液等因素对尿生成的影响.
2.学习急性中毒性肾衰动物模型的复制.
3.观察中毒家兔的一般状态;在与正常参数对照下,了解中毒家兔肾功能
的改变;进而根据各实验检测指标,判断,分析致病因素及导致急性肾
衰的可能发病机制.
4.通过利尿剂的应用,观察它对急性肾功能衰竭动物模型的治疗效果,并
分析其可能作用机制.
[实验原理]
1: 肾脏主要功能是泌尿功能.尿生成过程包括肾小球的滤过,肾小管与集
合管的重吸收和分泌过程.肾脏通过调节肾血流(RBF),肾小球滤过,肾小
管与集合管排泄与重吸收,影响肾脏尿液生成.
2: 急性肾功能不全(ARI): 由于双侧肾在短时间内其排泄功能急剧降低而
造成的临床常见综合征,具体指各种原因引起肾小球滤过率急剧降低,其标
志是少尿,即每日尿量少于400mL,含氮代谢废物排出障碍,迅速出现进行
性氮质血症,水电解质和酸碱平衡紊乱.
引起急性肾功能不全的主要原因:
肾前性:循环衰竭,肾灌流不足,
肾 性:实质性损伤,本身的器质性病变,肾毒素的影响(重金属铅,汞等)
肾后性:尿路阻塞,结石,肿瘤
肾功能不全与肾功能衰竭在本质上是相同的,只是在程度上有所区别.肾功能衰竭一般是指肾功能不
全的晚期,而肾功能不全则指病情从轻到重的全过程,即包括肾功能障碍所引起的功能代谢障得,也
包括机体抗损伤的适应代偿反应.但是,在实际应用中,这两个概念又是往往通用的.
肾性肾功不全临床特点:临床分为少尿型和非少尿型两种,前者多见.少尿型
一般出现少尿甚至无尿,非少尿型尿量可大于500m1/d.由于肾小管有器质
性损伤失去了浓缩和稀释功能,尿比重固定在1.010称为等渗尿,同时也失
去了重吸收钠的能力,尿钠浓度高(>40mm01/L),尿常规可发现血尿,镜检
有多种细胞并有管型(色素管型,颗粒管型和细胞管型).血液尿素氮(BUN:
3.57-7.14mmol/L)和血浆肌酐(Pcr)进行性升高,肌酐与尿素从尿中排出障
碍,尿肌酐/血肌酐20)有明显区别.
发病机制:
1: ATN00肾血流量重新分配00肾小球几乎无血液供应00肾小球滤过降
低为零
26
2: 肾中毒00近曲小管,髓袢升支粗段易遭损害00该断对 NaCl 的重吸收
少00到达远曲小管的Na浓度升高00刺激致密斑使肾素分泌增加00肾
素-血管紧张素系统被激活00血管紧张素Ⅱ增加00入球小动脉收
缩00GFR降低
3: 急性肾小管坏死00肾小管细胞肿胀,管型及坏死的细胞碎片00肾小管
阻塞00少尿
4: 肾小管上皮细胞受损00完整的屏障消失00原尿到达肾小管时便回漏到
肾间质00少尿
甘霉醇和利尿剂的使用:增加血流,扩张血管,减轻细胞损伤,
急性肾衰使用甘露醇和利尿剂可收到良好的预防和治疗效果.
(1)可减少超滤液在肾小管的重吸收,有助于清除阻塞肾小管的色素和蛋白管型.
(2)有助于解除微动脉的持续收缩,因为甘露醇,速尿和利尿酸等也属于血管扩张剂.
(3)克服无再流现象,高渗可减轻毛细血管内皮细胞的肿胀.
(4)降低缺血肾引起的肾素分泌.
(5)清除羟自由基,非特异性地保护肾功能,并降低血液粘滞度.
清除率(dearance,C)
是指两肾在单位时间(一般用每分钟)内能将多少毫升血浆中所含的某一物质完
全清除,这个被完全清除了某物质的血浆的毫升数就称为该物质的清除率. 计
算清除率时需要测量三个数值:尿中某物质的浓度(U,mg/100ml),每分钟尿量
(V,ml/min)和血浆中某物质的浓度(P,mg/100ml).
C=U×V/P
测定清除率的意义 测定清除率不仅可以了解肾的功能,还可以测定肾小球
滤过率,肾血流量和推测肾小管转运功能.
(一)测定肾小球滤过率(GFR)
1.菊粉清除率 为125ml/min, 所以,肾小球滤过率为125ml/min.
2.内生肌酐清除率 所谓内生肌酐,是指体内组织代谢所产生的肌酐.试验前
二,三日,被试者禁食肉类,以免从食物中摄入过多的外来肌酐.其他饮食
照常,但要避免剧烈运动或体力劳动,而只从事一般工作.在这种情况下,
受试者血浆中的肌酐浓度以及在一昼夜内尿中肌酐的排出总量都比较稳定.
这样,在进行肌酐清除率试验时,就不必另给肌酐溶液,只需从清晨起收集
24小时的尿,合并起来计算其尿量,并测定混合尿中的肌酐浓度.抽取少量
静脉血,测定血浆中的肌酐浓度,按下式可算出 24 小时的肌酐清除率.
肌酐清除率可大于菊粉清除率,达175ml/min,可以代表肾小球滤过率.
(二)测定肾血流量
660ml/rnin,这一数值代表了肾血浆流量.滤过分数就可以根据肾小球
滤过率和肾血浆流量计算.例如
滤过分数125/660=19%
27
如果血浆量占全血量的55%,则
肾血流量=660/55%=1200
(三)推测肾小管的功能
通过对肾小球滤过率和其他物质清除率的测定,可以推测哪些物质能被
肾小管重吸收,哪些物质能被肾小管分泌. 例如,可以自由通过滤过膜
的物质,如尿素和葡萄糖,它们的清除率均小于125ml/min (肾小球滤
过率),这必定这些物质滤过之后又被重吸收;但是,不能由此而推断说
该物质不会被分泌,因为只要重吸收量大于分泌量,其清除率仍可小于
125ml/min.如果一种物质的清除率大于125ml/min,表明肾小管必定
能分泌该物质,否则其清除率不可能大于肾小球滤过率.但是,不能由
此推断说该物质不会被重吸收,因为只要分泌量大于重吸收量,其清除
率仍可大于125m1/min.
[实验对象] 家兔(体重在3kg以上),1只/组.
[实验器材和药品]
1.器材 哺乳类动物手术器械1套,注射器,试管,加样器,生物信号采集系
统,计算机,7230分光光度计,水浴箱,离心机等.
2.药品 1%HgCI(重金属中毒00急性肾小管坏死00肾小管上皮细胞损
伤00少尿或无尿),0.9%NaCI,25%乌拉坦,0.6%酚红,1%呋塞米,
1:10 000肾上 腺素,20%葡萄糖,4%磺柳酸等.
[实验步骤]
1.复制肾衰动物模型 实验前一天,取两只家兔,称重,一只皮下或肌肉注射
1%HgClz (o.9mL/kg)造成急性肾功能衰竭作为实验组兔;另一只皮下
或肌肉注射等量的生理盐水(o.9mL/kg)作为对照组兔. 24h后,比较汞
中毒家兔及正常家兔的一般状态,情况与尿量.
2.动物称重,耳缘静脉或腹腔注射25%乌拉坦麻醉(5ml/kg体重),固定于兔
台上.实验开始时,先从家兔心脏采血3―5ml,置于一干燥试管中,放置
10min后,离心15min,3 000r/min,小心吸取血清置于另一干净试管中,
备测血肌酐.
3.生理盐水对照组 施颈部手术,分离左侧颈总动脉,在动脉下穿两根丝线,
一根结扎动脉的远心端,近心端用动脉夹夹闭.在结扎线下方的动脉壁上
剪一小斜口,然后向心脏方向插入已充满生理盐水或抗凝液的动脉导管,
用另一根丝线结扎固定,通过压力换能器输入计算机,用以描记动物血压.
4.分离右侧颈外静脉用于输液.
5.下腹部正中剪毛,在耻骨联合上约lcm处做长约4cm的切口,暴露膀胱,用
注射器收集2ml尿液于试管中,备测尿生化,尿常规.
6. 在膀胱底部,找出两侧输尿管并分离之.在近膀胱端结扎输尿管,稍等片
刻,待其略充盈后,用眼科剪剪一小口,向肾脏方向插入一细塑料管(塑料管事
先用肝素冲洗或充满肝素),结扎并固定,用于收集尿液,通过记滴器输入计算
机.
28
7: 对照组动物做影响尿生成因素的观察
(1)打开计算机,进入B1―410生物信号采集实验操作系统,激活"实验项目",
选择"影响尿生成因素"实验模块,调节适当的实验参数,选择记录开始.进行
各项观察以前先记录2min的尿量和血压曲线作为对照,然后再开始.
(2)耳缘静脉注射37℃的生理盐水20mL,观察动物血压的变化,记录尿量5min.
结果:尿量增多,血压升高
机制:a:血液稀释00血浆胶体渗透压降低00肾小球有效滤过压升高00尿
量增多
b:血容量增加00左心房被扩张00刺激容量感受器00传入神经经迷
走神经传入中枢00抑制下丘脑-垂体后叶系统释放抗利尿激素
(ADH)00远曲小管,集合管对水的重吸收减少00尿量增多
c:血容量增加00心输出量增加00动脉血压升高00刺激颈动脉窦压
力感受器00反射性抑制抗利尿激素的释放00尿量增多
d:血容量增加00心输出量增加00肾小球毛细血管血压升高00肾小
球有效滤过压升高00尿量增多
(3)耳缘静脉注射20%葡萄糖5mL,观察同前.
结果:尿量增多,血压无明显变化
机制:原尿中的葡萄糖浓度=血糖浓度,但终尿不含葡萄糖,说明葡萄糖
全部被重吸收回血,其重吸收部位仅限于近曲小管,肾小管对葡萄
糖的重吸收有一定限度,当血糖升高,超过肾糖阈
(180mg/100ml)00 一部分肾小管对葡萄糖的吸收已达极限,糖
不能被近端小管完全重吸收00肾小管液中溶质浓度升高,渗透压
增大00水重吸收减少00尿量增加
(4)耳缘静脉注射1:10 000肾上腺素0.3ml,观察同前.
结果:尿量减少,血压升高
机制:a:肾上腺素作用于心肌,传导系统及窦房结的 β 受体00加强新
肌收缩力,加速机制:传导,加速心率00心排出量增加00血
压升高
b:入球小动脉：出球小动脉=2：1,肾上腺素与肾血管平滑肌 α
受体结合00入球小动脉的收缩大于出球小动脉的收缩00肾小
球毛细血管压减小,肾血流量减小00尿量减少
(5)耳缘静脉注射1%呋塞米(1mL/kg体重),观察同前,并用收集的尿液测尿钠
含量.
结果:尿量增加
机制:a: 髓袢升支粗段对水的通透性很低,而NaCl被上皮细胞重吸收,因而
小管液低渗,组织间液高渗,当抗利尿激素释放被抑制时,远曲小管
和集合管对水的通透性非常低00髓袢升支粗段的小管液流经远曲
小管和集合管时,NaCl 被重吸收,而水不被重吸收00小管液渗透
浓度进一步下降00尿量增加
29
b: Na：2Cl：K 同向转运体对速尿,利尿酸敏感,它们与其结合后抑制
其转运功能,NaCl重吸收受抑制00髓质渗透梯度遭到破坏00水重
吸收减弱00尿量增加
8.酚红排泄率测定与尿液取样
(1)两组家兔耳缘静脉注射o.6%酚红溶液(1mL/kg体重),接着从颈静脉
插管处注射20%葡萄糖(30ml/kg).收集从开始注射酚红起15或30min
的尿液.换算成单位时间的尿量(7ml/min).
机制:酚红是一种对机体无害的染料,进入机体后,几乎全部从肾脏排出,
(2)各取o.1ml尿样置于干净试管中,备测尿肌酐.
(3)将收集的尿液倒入500ml量筒内,加10%NaOH 10ml,用自来水补充至
500ml处,混匀,取适量放入与比色管口径相同的试管中,与标准比色管
比较,得出15或30min内肾脏酚红排泄率.
9.实验组家兔(急性肾功能衰竭)――治疗实验 耳缘静脉注射 1%速尿(1ml/
kg体重)观察给药后5min的尿量和30min的总尿量,测定给药后尿中钠
的含量,与给药前尿钠(对照组家兔)进行比较.
10.肾形态学观察 处死家兔,取出肾脏,称肾重量,计算肾体比,比较两组
家兔肾脏外形.纵向剖开肾脏,观察皮髓质条纹,色泽等.
11.尿常规检查
(1)尿蛋白测定:取少量尿液滴于玻片上,加 4%磺柳酸一滴,观察其是
否浑浊,根据浑浊程度判断尿蛋白的含量,判断标准:
"一"尿液清晰不浑浊
"+"表示尿液出现轻度白色浑浊[含蛋白质(o.01～o.05)g%]
"+十"表示尿液稀薄乳样浑浊[含蛋白质(o.05～o.2)g%]
"++十''表示尿液乳浊或有少量絮片存在[含蛋白质(o.2～0.5)g%]
"++十十"表示尿液出现絮状浑浊(含蛋白质>o.5g%)
(2)尿液镜检:取少量尿液滴于载玻片上,镜下观察细胞及管型,观察细胞
至少检查10个高倍视野,管型至少检查10个低倍视野.
血清和肌酐含量测定
1:血清和尿液肌酐含量测定――苦味酸沉淀蛋白法
原理:在碱性条件下,苦味酸与(血,尿中)肌酐作用,生成黄色苦味酸肌酐,使溶液呈
色后进行比色测定,然后加醋酸,在酸性环境中,黄红色的苦味酸肌酐被清除,非肌酐
物质(假肌酐)呈色,两者比色之差为血及尿中的肌酐.
按表7―8,7-9的操作步骤测定血清及尿液肌酐
血清肌酐含量测定(Ml)
30
把各试管混匀,37C水浴30min,以510nm波长比色,空白管调零,读OD值,然后在各
试管内滴加醋酸两滴,放置6min后,再测OD*值.
[Cr]p(mg%)=OD-OD*/ OD标×0.01/0.2×100
正常值:0.7～0.8 mg%
尿肌酐含量测定(Ml)
把各试管混匀,放置10min后加蒸馏水6.0ml,摇均,以530nm波长比色,空白管调
零,读OD值.
[Cr]u(mg%)=OD测/ OD标×0.05mg×100ml/0.1ml
新乡医学院实验课教案首页
课程名称:机能实验学 授课教师姓名及职称:白瑞樱 助教
一,题目 机能学实验设计与方法
二,对象 2004级本科临床各专业学生
三,单元教学目标
与课时分配
1.理论讲解1学时.
2.学生操作4学时.
成 分 标 准 管 测 定 管 空 白 管
肌酐标准应用液 0.20 - -
血 清 - 0.20 -
蒸 馏 水 - - 0.20
碱 性 苦 味 酸 2.0 2.0 2.0
NaOH 2.0 2.0 2.0
成 分 标 准 管 测 定 管 空 白 管
尿液(1:50稀释) - 0.1 -
Cr标准应用液 0.1 - -
蒸 馏 水 - - 0.1
碱 性 苦 味 酸 2 2 2
12.5% NaOH 2.5 2.5 2.5
31
四,授课重点 实验设计的相关基本理论知识.
五,授课难点
1. 复习乙酰胆碱,新斯的明,毛果芸香碱的药理
特性;
2.设计较完整的实验方案,分辨出三种药物
六,授课形式 小班实验课
七,授课方法与课
前准备
认真备课;
采用启发式教学;
了解学生已学同期课程药理学内容;
围绕重点,难点,深入浅出
八,教材与参考文
献
《药理学》第六版
《病理生理学》第六版
《生理学实验方法》李东亮主编
《医用机能实验学实验指导》刘巨源主编
《机能实验学》高兴亚等主编
九,思考题
1. 新斯的明为什么对离体腹直肌的作用不明显
2. 腹腔注射的乙酰胆碱为什么对机体作用不明
显
十,教研室审查意见 主任签字
新乡医学院 生理学与神经生物学教研室
2006.10.29
机能学实验设计与方法
【实验目的】
1.学习实验设计相关的理论知识,初步掌握实验设计的原理及要素.
2.根据已有的理论知识,完成实验设计,分辨出三种药物乙酰胆碱,
新斯的明和毛果芸香碱.
32
【实验原理】
(一)实验设计的基本程序
立题,设计,预备和正式实验,实验资料的收集,整理,统计分析,
总结和撰写论文等方面.
立题要注意科学性,先进性,可行性和实用性.
(二)实验设计的三项基本原则
1.对照原则:(1)阴性对照:1)空白对照;
2)实验对照;
3)安慰剂对照.
(2)阳性对照
(3)自身对照
(4)相互对照
2.重复原则:
3.随机原则:(1)完全随机
(2)均衡随机
(三)实验设计的三大要素
1.明确实验目的
2.确定实验方法和指标 强调客观性,特异性,重现性和灵敏性
3.选取实验样本 要注意选择接近于人类而又经济的动物,动物年
龄,体重,性别最好一致,并且实验样本要根据实验目的,方法和指
标而定.
(四)三种药物乙酰胆碱,新斯的明和毛果芸香碱的药理学特性
33
乙酰胆碱(acetylcholine, Ach):是胆碱能神经递质,化学性质不稳
定,遇水易分解.由于作用十分广泛,且在体内为胆碱酯酶迅速破坏,
故除作为药理学研究的工具药外,无临床实用价值.
1.M样作用 静脉注射小剂量Ach即能激动M胆碱受体,产生与
兴奋胆碱能神经节后纤维相似的作用,引起心率减慢,血管舒张,血
压下降,支气管和胃肠道平滑肌兴奋,瞳孔括约肌和睫状肌收缩以及
腺体分泌增加等.舒张血管可能是激动血管内皮细胞的M受体使内皮
细胞释放依赖性舒张因子所致.
2.N样作用 剂量稍大时,Ach也能激动N胆碱受体,产生与兴
奋全部植物神经节和运动神经相似的作用.还能兴奋肾上腺髓质的嗜
铬组织(此组织在胚胎发育中与交感神经节的来源相同,受交感神经
节前纤维支配),使之释放肾上腺素.许多器官是由胆碱能和去甲肾
上腺素能神经双重支配的,通常是其中一种占优势.例如,在胃肠道,
膀胱平滑肌和腺体是以胆碱能神经占优势,而心肌收缩和小血管方面
则以去甲肾上腺素能神经占优势.故在大剂量Ach作用下,全部神经
节(具N1胆碱受体)兴奋的结果是胃肠道,膀胱等器官的平滑肌兴奋,
腺体分泌增加,心肌收缩力加强,小血管收缩,血压升高.Ach还激
动运动神经终板上的N2胆碱受体,表现为骨骼肌兴奋.过大剂量的
Ach很易使神经节从兴奋转入抑制.
毛果芸香碱:又名匹鲁卡品(pilocarpine)是从毛果芸香属
(pilocarpus属)植物中提出的生物碱,基水溶液稳定,也能人工
合成.能选择性地激动M胆碱受体,产生M样作用.对眼和腺体的作
用最明显.
1.眼 滴眼后能引起缩瞳,降低眼内压和调节痉挛等作用:
34
(1)缩瞳虹膜内有两种平滑肌,一种是瞳孔括约肌,受动眼神
经的副交感神经纤维(胆碱能神经)支配,兴奋时瞳孔括约肌收缩,
瞳孔缩小;另一种是瞳孔开大肌,受去甲肾上腺素能神经支配,兴奋
时瞳孔开大肌向外周收缩,瞳孔扩大.用毛果芸香碱后,可激动瞳孔
活约肌的M胆碱受体,表现为瞳孔缩小.
(2)降低眼内压房水是从睫状体上皮细胞分泌及血管渗出而产
生,经瞳孔流入前房,到达前房角间隙,主要经小梁网(滤帘)流入
巩膜静脉窦,最后进入血流(图6-1,6-2).毛果芸香碱可通过缩
瞳作用使虹膜向中心拉紧,虹膜根部变薄,从而使处在虹膜周围部分
的前房角间隙扩大,房水易于通过小梁网及巩膜静脉窦而进入循环,
结果使眼内压下降.
(3)调节痉挛使晶状体聚焦,适合于视近物的过程,称为调节.
眼睛的调节主要取决于晶状体的曲度变化.晶状体囊富有弹性,使晶
状体有略呈球形的倾向,但由于睫状小带(悬韧带)向外缘的牵拉,
通常使晶状体维持于比较扁平的状态.睫状小带又受睫状肌控制,睫
状肌由环状和辐射状两种平滑肌纤维组成,其中以胆碱能神经(动眼
神经)支配的环状肌纤维为主.动眼神经兴奋时或用拟胆碱药如毛果
芸香碱时使环状肌向瞳孔中心方向收缩,结果使睫状小带放松,晶状
体变凸,屈光度增加,只适合于视近物,而看远物则难以使其清晰地
成像于视网膜上;故看近物清楚,看远物模糊.拟胆碱药的这种作用
称为调节痉挛.睫状肌的辐射状肌纤维受去甲肾上腺素能神经支配,
但这在眼睛调节中不占重要地位,故拟肾上腺素药一般不影响调节.
2.腺体 吸收后能激动腺体的M胆碱受体,汗腺和唾液腺分泌增
加最明显.
新斯的明(neostigmine, prostigmine)是人工合成品.
35
化学结构中具有季铵基因,故口服吸收少而不规则.一般口服剂
量为皮下注射量的10倍以上.不易透过血脑屏障,无明显的中枢作
用.溶液滴眼时,不易透过角膜进入前房,故对眼的作用也较弱.
新斯的明能可逆地抑制胆碱酯酶,表现乙酰胆碱的M和N样作用.新
斯的明对心血管,腺体,眼和支气管平滑肌作用较弱,对胃肠道和膀
胱平滑肌有较强的兴奋作用;而对骨骼肌的兴奋作用最强,因为它除
通过抑制胆碱酯酶而发挥作用外,还能直接激动骨骼肌运动终板上的
N2胆碱受体以及促进运动神经末梢释放乙酰胆碱.
【实验对象】 小白鼠, 蟾蜍, 家兔
【实验器材和药品】
1.器材 蛙类手术器械1套,1ml注射器,三角板,BL-410生
物信号采集系统,恒温平滑肌槽,张力换能器,铁架台,双凹夹,螺
旋夹,麦氏浴槽
2.药品 任氏液,生理盐水,乙酰胆碱,新斯的明和毛果芸香碱
【方法与步骤】
1.取3只小白鼠,分别称重,按0.1ml/10g,腹腔注射A,B,C三
种药物,观察反应.
2.取2只家兔,先用三角板测量瞳孔直径,分别在4只眼睛中滴生理
盐水,A,B,C三种药物,观察反应.
3.取1只蟾蜍,破坏脑和脊髓,制备腹直肌条,悬挂于麦氏浴槽中,
连接到BL-410生物信号采集系统.分别加入生理盐水,A,B,C三
36
种药物各0.2 ml,每次加药要冲洗麦氏浴槽一次,做好标记,观察
张力曲线的变化.
【实验结果】
1.小白鼠腹腔注射现象:
毛果芸香碱会使动物出现:唾液分泌增加,泪腺分泌增加,大便失禁;
新斯的明会使动物出现:肌肉震颤;
乙酰胆碱会使动物出现:扭体反应.
2.家兔滴眼反应:
毛果芸香碱会使家兔瞳孔明显缩小;
新斯的明和乙酰胆碱缩瞳效果均不明显.
3.蛙腹直肌收缩反应:
毛果芸香碱不会引起肌肉的收缩;
新斯的明会使肌肉发生较微弱的收缩;
乙酰胆碱可以使腹直肌明显收缩.
综上所述,由以上的现象区分出三种药物.
【注意事项】
1.家兔瞳孔观察时,注意要在同等的光线条件下观测;
2.给小鼠腹腔注射时注意要避开肠管;
3.腹直肌标本制作时避免用金属器械及手碰触,用力牵拉肌肉;
4.腹直肌收缩观察时,每次加药前将浴槽用任氏液反复冲洗3～4次,
尽量排除药物间的相互干扰.
【思考题】
37
1.新斯的明为什么对离体腹直肌的作用不明显
2.腹腔注射的乙酰胆碱为什么对机体作用不明显
38
新乡医学院实验课教案首页(病理生理学)
课程名称::病理生理学 授课教师姓名及职称:
一,题目 家兔急性失血性休克
二,对象
本科各个专业
三,单元教学目标与
课时分配
1.理论讲解1学时.
2.学生操作4学时.
合计5学时
四,授课重点
1.动物模型的复制
2.灌流盒的应用
3.微循环的寻找与观察
五,授课难点
1.动物模型的复制
2.灌流盒的应用
3.微循环的寻找与观察
六,授课形式 小班实验课
七,授课方法与课前
准备
教师讲解,学生操作,师生共同讨论;课前充分查阅相关资料,认真备课
八,教材与参考文献
1.病理生理学(第四版,金惠铭主编)
2.病理生理学(第六版,金惠铭,王建枝主编)
3.病理生理学实验(孙银平主编)
4.机能学实验指导(刘巨源主编)
九,思考题
1.血管活性药物的选择
2.休克的表现以及发生机制
3.休克的抢救原则
十,教研室审查意见 主任签字
新乡医学院 病理生理学 教研室 2006年9月20日
39
新乡医学院实验课教案
课程名称:病理生理学 任课教师:
基本内容 教学手段和教学组织
急性失血性休克
【实验目的】:
1.掌握失血性休克动物模型的复制,观察休克时微循环及血压的变化.
2.设计抢救方案,了解休克抢救时扩容及应用血管活性药物的意义,加
深对休克防治原则的理解.
3.理解休克的发病机制关键不在血压而在血流.
【实验原理】
1.休克(shock):是各种强烈致病因子作用于机体引起的急性循环衰竭,
其特点是微循环障碍,重要脏器的灌流不足和细胞功能代谢障碍,由此
引起的全身性危重的病理过程.
2.休克的分期与发病机制
(1)缺血性缺氧期(ischemic anoxia phase)
休克早期交感肾上腺髓质系统兴奋.休克时儿茶酚胺大量释放,既刺
激 受体,造成皮肤,内脏血管明显痉挛,又刺激 受体,全身小血管
包括小动脉,微动脉,后微动脉,毛细血管前括约肌,微静脉和小静脉
都持续痉挛,微动脉,后微动脉,毛细血管前括约肌收缩更明显,大量
真毛细血管网关闭,血液只限于直捷通路,动-静脉短路开放,组织血液
灌流量减少,缺血缺氧,出现少灌少流,灌少于流的情况.上述变化可
使毛细血管内压下降,组织液入血增多(自身输液);微静脉和小静脉收
缩使回心血量增加(自身输血),这些变化有助于维持动脉血压.由于儿
茶酚胺的选择性缩血管功能,皮肤,腹腔内脏,骨骼肌血管收缩明显,
血流量减少,而心脑血管口径变化不大,以优先保证心脑血液供应.因
此,缺血缺氧期又称为代偿期.
(2 )淤血性缺氧期(stagnant anoxia phase)
长期缺血和缺氧引起组织氧分压下降,CO2 和乳酸堆积,发生酸中毒.
酸中毒导致平滑肌对儿茶酚胺的反应性降低;持续缺血缺氧引起酸中毒
扩血管性物质(组胺,激肽,腺苷,K+等),内毒素入血,引起血管扩张.
毛细血管前括约肌舒张,血液大量涌入真毛细血管网,微动脉,后微动
脉痉挛减轻.在毛细血管的静脉端和微静脉血流缓慢,红细胞聚集,白
细胞滚动,粘附嵌塞,血小板聚集,血浆外渗到血管外,血粘度增加,
休克的临床重要性导
入主题
理论课已讲过,可以
提问的方式讲解
40
新乡医学院实验课教案
课程名称:病理生理学 任课教师:
基本内容 教学手段和教学组织
组织灌而少流,灌大于流.血流很慢,血浆和血细胞分离,发生淤血性
缺氧.
(3)微循环衰竭期
当休克进入淤血性缺氧期后血流速度缓慢,酸中毒越来越重,血液处于
高凝状态,再加上感染,烧伤,创伤或异型输血等休克动因的作用,导
致弥散性血管内凝血的发生.此时微循环内有微血管扩张(血管口径变
大),有大量微血栓(血块)阻塞血管,继发出血,微循环血流停止(血
流不动),不灌不流.微血管平滑肌麻痹,对任何血管活性物质失去反应,
又称微循环衰竭期.由于缺氧,酸中毒和休克时产生的体液因子的作用,
可使许多重要器官发生不可逆损伤,出现器官功能衰竭.这些都给休克
的临床治疗带来极大的困难,通常称该期为不可逆休克或难治性休克.
3.休克防治的病理生理基础
一,病因学防治 防治原发病,去除休克原始动因.
二,发病学防治
纠正酸中毒;扩充血容量;合理使用血管活性药;细胞损伤的防治;体
液因子的拮抗剂;防止器官功能衰竭.
【实验动物】
家兔(雄性成年家兔)
【实验器材与药品】
器材:兔台,哺乳类实验器材一套,动脉夹一个,气管插管一个,动
脉插管一个,静脉输液装置,压力换能器,灌流盒,显微镜,手术线等.
药品;20%乌拉坦,50U/ml肝素,1/万NE,654-2,生理盐水,台式液
【实验步骤】
1.一般过程.
抓取―秤重―固定―麻醉―备皮
麻醉:麻醉药物20%氨基甲酸乙脂5ml/kg,通过耳缘静脉注射.
成功标志,夹肢反射,角膜反射消失,注射要缓慢,并确边注射边观察.
备皮范围:甲状软骨向下纵行6―7cm
2.颈部手术
手术范围:甲状软骨向下纵行6―7cm.
主要注重原则的讲解
简单讲解
41
新乡医学院实验课教案
课程名称:病理生理学 任课教师:
基本内容 教学手段和教学组织
钝性分离气管,右侧颈外静脉,左侧总动脉后,气管下备一根线,血管
下面各备两根线.
3.插管
气管插管:在甲状软骨环下第 2--3 软骨环之间做一个倒"T"形切口,
然后将气管插管朝向肺脏的方向插入,并旋转 180.用备用
线接扎固定,并二次固定.
静脉插管:首先将与静脉插管相连的输液器里面的气泡排空,然后先结
扎远心端,然后再靠近远心端处做一个"v"字型切口,切口
的大小以血管的1/3―1/2为宜,然后将排空气泡的静脉插管
朝向心脏的方向插入静脉,用备用线结扎并二次固定防止插
管脱落,打开输液装置以 15―20 滴/分钟的速度保持静脉插
管的通畅.
动脉插管:首先用肝素将与压力换能器相连的动脉插管里面的气泡排空,
然后以 1ml/kg 肝素进行全身肝素化,并且每隔一小时加注
1ml 肝素以维持全身肝素化,用动脉夹夹闭家兔颈总动脉的
近心端,用备用线结扎颈总动脉远心端,两者之间距离尽量
长以便手术操作,用眼科剪再靠近远心端的地方做一个"v"
切口的大小以管径的1/3―1/2为宜,然后将充满肝素的动脉
插管朝向心脏的方向插入动脉,结扎并二次固定,防止插管
脱落,最后打开动脉夹并且打开电脑准备观察.
4.腹部手术
在家兔左侧下腹部做一5～7cm的切口,打开腹腔,找到回肠袢,
把它拉出体外,把肠系膜平铺到恒温微循环灌流盒里(盒内盛有38℃台
氏液,液面高度恰好淹没小平台),用显微镜观察肠系膜微循环.
5.复制失血性休克动物模型
(1)少量放血:松开压力换能器侧管上的止血钳,将血液放置于抗凝
处理的注射器中,放血量约为总血量(总血量70―80/ml)的10%同时
密切观察血压变化.
(2)大量放血:在次松开压力换能器侧管上的止血钳放血与抗凝处理
的容器中,放血量约为总血量的10%,使总的放血量达到20%,边放血
边观察微循和血压的变化,直至出现休克.
插管时一定要注意二
次结扎固定特别是动
脉
为了防治血液凝固,
一定要注意全身肝素
化以及用肝素排空压
力换能器里面的空气
从而充满动脉插管
详细讲解灌流盒的用
法.
强调一定要边放血边
观察
42
新乡医学院实验课教案
课程名称:病理生理学 任课教师:
基本内容 教学手段和教学组织
6.观察项目
(1)皮肤,粘膜,提起耳壳对光透视血管口径及颜色
(2)兔肠系膜微循环活体镜检观察
(3)血压的观察
7. 实验性抢救
(1)回输血液,5分钟内输完.
(2)输入生理盐水,滴速40～50滴/分
(3)选择性应用血管活性药物
8. 处死动物,讨论
【注意事项】
1.注意麻醉程度.
2.手术中尽量减少出血.
3.保持管道通畅.
4.动脉插管一定要肝素化,避免凝血
【结果讨论】
1.失血性休克
少量放血:可以观察到血压的骤降,主要原因是由于血液的丢失,导致
循环血量的减少而引起的动脉血压下降.停止放血,可以观察到血压有
所回升,主要原因是由于血容量减少和血压的降低,使容量感受器(心
房和大静脉)和压力感受器(颈动脉窦和主动脉弓)传入冲动减少,反射
性地引起交感神经兴奋.少量放血后镜下微循环初始减慢,但仍然是线
流或者是粒线流,此期微循环的特点是少灌少流,灌少与流.处于休克
早期,经过代偿,血流速度基本恢复正常.
大量放血:当快速失血量超过机体总量的20%时,称为大量失血,此时
可以观察到血压明显下降,这是由于机体代偿不足所致.机体的代偿不
是无限度的,大量失血,组织缺血缺氧加重,无氧酵解增强,乳酸生成
增多,造成酸中毒.酸中毒使微血管的平滑肌对儿茶酚胺的反应性降低,
加上局部扩血管物质增多,导致微循环从早期的收缩转为扩张状态,再
加上血液流变学的改变,使血液淤积在微循环中,导致有效循环血量的
进一步减少,血压进行性下降.所以这个阶段已经进入了休克期.大量
放血后微循环发生明显改变,血流速度明显减慢,由原来的线流,粒线
流变为粒流,甚至出现泥化现象.
2. 抢救
①输血:新鲜全血是目前为止治疗失血性休克最好最有效的复苏液,可
以扩充血容量,同时具有抑制细胞凋亡的作用.实验中我们输入新鲜全
血,可以明显观察到血压的回升和微循环的改善
②输液:输入全血后再进行输液,充分补充血容量,可以观察到血压的
回升和微循环的再通.在休克期,机体循环血量的丢失,不仅仅是我们
从动脉放出的血液,在休克期,毛细血管后阻力大于前阻力,血管内流
血液回输要通过静脉
回输
43
新乡医学院实验课教案
课程名称:病理生理学 任课教师:张大伟 助教
基本内容 教学手段和教学组织
体静力压升高,血浆外渗到组织间隙;另外,组胺,激肽,心肌抑制因
子等引起毛细血管通透性增高,促进了血浆外渗.所以下降的循环血量
不仅仅是由于动脉放血造成的,还包括从血管外渗到组织间隙的血浆成
分以及我们手术操作过程中丢失的血液.所以休克期的扩容不仅仅要补
充已经丢失的血量,还要补充血浆外渗后滞留在组织间隙的血浆量以及
手术失血量.
③活血管药物的选择性应用
早期:舒血管药物缓解微血管过度代偿出现的强烈收缩,必须在充分
扩容的基础上应用,避免出现一过性血压下降.
晚期:缩血管药物,对肌性小静脉或微静脉起轻度选择性收缩作用,
防止容量血管过度扩张.
其他:过敏性休克,神经源性休克,缩血管药物为最佳选择.
代表性药物:
NE:主要应用于各种休克(出血性休克例外)早期血压骤降,小剂量
NE 短时间静脉灌注,保证心脑等重要器官血供,休克经补足血容量后
血压仍不能回升者或者外周阻力明显降低及心排出量减少者,休克的关
键是微循环血量灌注不足和有效血容量下降,治疗的关键是改善微循环
和补充血容量.NE 的应用只是暂时措施,长时间或大量应用使动脉血
压增加过高,心排出量反而下降,加重微循环障碍.现主张NE 与酚妥
拉明合用拮抗缩血管作用,保留B效应.去甲肾上腺素和酚妥拉明的功
效:酚妥拉明是α受体阻断剂,能对抗去甲肾上腺素对α受体的兴奋作
用,使动脉扩张,使休克引起的毛细血管后阻力降低,从而改善微循环,
可反射性的兴奋心脏,增强心肌的收缩能力,增加心输出量.两药的合
用能提高心脏指数,缩短微循环障碍时间,改善微循环灌注,提高休克
治愈率.
654-2:即山莨菪碱,阻滞α受体,对抗儿茶酚胺引起的微动脉痉挛,
较大剂量的山莨菪碱能促进微动脉和微小静脉的自律运动,有利于推动
动脉循环的血流流动,促进低血容量休克的好转.在充分扩容的基础上
应用,能减轻休克中微循环的淤滞,提高组织灌流,有利于血压回升.
【思考题】
1.失血性休克的发生机理是什么 输血补液为何能改善微循环
2.为何输血后还要输液
3.休克时如何正确使用血管活性药物进行抢救
44
45
实验课教案首页
新乡医学院生理与神经生物学教研室 2006.9. 3
一 题目 常用仪器介绍
二 对象 2004级麻醉专业
三 课时目标
与
课时分配
1.理论讲解1学时.
2.学生操作3学时.
四 授课重点 家兔的基本操作
五 授课难点
1.麻醉生理学开设的意义
2.家兔的麻醉
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与
课前准备
认真备课;
采用启发式教学;
围绕重点,难点,深入浅出;
八
参考书
《生理学》第六版
《生理学实验方法》李东亮主编
《麻醉生理学实验讲义》
《药理学》第六版
九 思考题
十,教研室审核意见 主任签字
46
一.实验课的目的和要求
(一)目的 掌握基本操作技术,了解获得麻醉生理学知识的科学方
法,验证和巩固基本理论;培养对科研工作的态度,要求,方法及实
事求是的工作作风,培养观察,比较,分析,综合能力及独立思考的
能力.
(二)要求
1.实验前 阅读实验指导,复习理论,思考预期结果及误差.
2.实验时 领器材,摆放整齐,认真进行实验操作,实验现象的观
察和记录,有关器材的损坏或缺少.
3.实验后 归还器材,实验结果的处理(具体数值,单位,曲线,
表格),实验报告的书写.
二.实验室守则
要求同学自己学习.
三.BL-Newcentury使用
学习血压,肌肉张力,脑电波,呼吸运动等实验模块,掌握曲线的缩
放,基线的调整,刺激参数的设置,实验标记.
上区
1,标题栏
2,菜单栏
输入信号 CH1,2,3,4通道可接受压力,张力,动作电位,神经
放电,肌电,脑电,心电,慢速电信号,呼吸及温度等生物信号.
3,工具栏
开始记录 暂停记录 停止记录(单击后出现一个
框面,不存盘取消即可) 黑白方块 背景切换(单击后白色背景
变成黑色)
两点测量
区间测量
右区 控制区与信息区
包括控制参数调节区,显示参数设置区,普通信息显示区及专用信息
显示区
1, 显示
47
G 增益调节旋钮
T低频滤波:去除信号中低于此频率的波.周期0.001s,0.01s,0.1s,
5s,DC(直流电)
F 高频滤波:去除信号中高于此频率的波.
50HZ交流电抑制:禁止50HZ波形通过,按一下则激活,再按一下
失活.
走纸速度:三角右移,走纸越快,波形展开;反之,走纸越慢,波形
压缩.
2, 显示
前景色 信号线色
背景色 背景颜色
格线色
背景
控制音响
3,灯泡1显示
当前值:两点间测量读数
时间:当前时间情况
频率
最大值:最大波最高
最小值:负向波最低
平均值:正负值相加
峰峰值:两波峰间距离
面积:曲线与基线包围的面积
4,灯泡2即特殊信息显示区:专用于设置参数,为新实验
准备.
左区 设置刺激
1,模式 粗电压,粗电流为粗调
细电压,细电流为细调
2,方式 单刺激
双刺激
串刺激:设置好刺激参数
连续单刺激
连续双刺激
48
3,延时:刺激命令发出后与刺激已输出之间的间隔.
4,波宽:刺激延续时间.
5,波间隔:两个刺激之间的间隔.
6,频率:刺激次数.
7,强度:单刺激和双刺激.
四.仪器介绍
兔头立体定位仪:用于固定兔头,便于进行实验操作.
肛温计:用于测定家兔体内温度.
实验槽:用于固定家兔,盛冰水混合物用于观察低温环境对家兔呼吸
循环功能的影响.
小鼠固定器:它是根据鼠身体形设计的塑料制品,分前盖,中筒,后盖三部分,均有螺纹可
相连.前盖上有二个管口,供鼠呼吸或给挥发性药物用,在前盖与中筒之间有一个中空的橡
皮垫,作固定鼠头与密闭中筒气室用.后盖的中间有仪孔,以便将鼠尾露出,供尾静脉给药
用.在中筒内放一块塑料片,当鼠进入固定器后,此片是插在管口与鼠腹之间,可阻止鼠身
的扭动和鼠身堵住管口,以保证呼吸曲线的描记.
(一) 兔
1抓取:右手抓住其颈部皮肤,轻轻提起,左手迅速托拄其臀部
2兔耳缘静脉麻醉
耳缘静脉位于耳背面外侧缘,拔去兔毛(用手轻弹,或用水湿润局部),使静脉血管充盈,
扩张,便于穿刺进针.左手拇指和无名指固定兔耳远端,食指和中指捏住近心端,右手持注
射器,以 15 ~20 角刺入血管(尽量从远心端开始),当回抽有血或阻力小时,可推进注射
器.
注意: 麻醉速度,剂量(氨基甲酸乙酯1g/kg),随时检查深浅反射.
3 固定:四肢夹于兔台四个兔夹上,细线挂其门牙固定头部.
4 颈部手术操作
⑴剪毛:粗剪刀压着皮肤,逆毛发生长放向剪,兔毛放置于盛水的兔毛缸内,剪毛区要大于
手术区.
⑵暴露气管:手扪及甲状软骨,用剪刀切开皮肤约6~7cm长(上起甲状软骨,下达胸骨上缘).
切开皮下,钝性分离肌肉,注意避开血管,以免造成大出血.
⑶气管插管:气管充分暴露后,穿线备用,在甲状软骨下第3,4环状软骨之间做一横形切
口(1/3-1/2气管周长),再向上做一纵形切口,使成倒"T"字形.气管插管斜面向下,从
切口处向肺脏方向插入,用棉线结扎固定,并用线的残端扎于气管插管分叉处,以防脱落.
49
⑷分离血管,神经
左手食指及拇指捏住切口一侧皮肤,其余三指用力向上顶,在气管两侧暴露血管神经鞘.
血管神经鞘内有:颈总动脉
迷走神经:最粗大,银白色,位于外侧.
交感神经:稍细,位于内侧.
减压神经:最细,位于两者之间.
⑸动脉插管(用于测量血压,放血等)
a.分离足够长的颈总动脉(2-3cm),穿两根线备用.
b. 全身血液肝素化 0.3% 1ml/kg体重.
c. 结扎远心端,尽量靠头端.
d.用动脉夹夹闭近心端,尽量靠心脏端(结扎线距动脉夹应有2cm).
e.用眼科剪在尽可能靠近结扎线处,剪1/3-1/2血管周长的切口.
f.将充满抗凝剂(枸橼酸钠)的动脉插管插向心脏,在血管上结扎插管,并用线的残端结扎
血管外动脉插管.
g.松开动脉夹,可以放血或做其他操作.
⑹静脉插管(用于注射,取血,输液和中心经脉压测量)
a.分离颈外静脉1-2cm,穿两线备用,并全身血液肝素化.
b.先用动脉夹夹闭静脉的近心端,待静脉充盈后再结扎远心端
c.在静脉上靠近远心端结扎线处有眼科剪呈45 度剪一小口(1/3-1/2血管周长),将充满抗
凝剂的插管插入.
5.腹部手术,输尿管插管
腹部备皮,在耻骨联合上方1cm切开大约4cm,沿腹白线剪开皮下,腹肌,暴露膀胱.
输尿管插管:在膀胱底部寻找双侧输尿管,细心分离,穿线备用;在输尿管近膀胱处
45 角剪口(小于输尿管周径1/2),插管,结扎.
(三)处死方法
家兔:耳缘静脉注射空气(20-40ml)
小白鼠:颈椎脱臼法:左手拇指按住头部,右手用力向后拉尾部,使脊髓与延髓拉断,动物
立即死亡.
50
实验课教案首页
新乡医学院生理与神经生物学教研室 2006.9.18
一 题目 低温对蛙心活动的影响
二 对象 2004级麻醉专业
三 课时目标
与
课时分配
1.理论讲解1学时.
2.学生操作3学时.
四 授课重点 蛙心活动的观察
五 授课难点
1.蛙心插管
2.实验观察
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与
课前准备
认真备课;
采用启发式教学;
围绕重点,难点,深入浅出;
八
参考书
《生理学》第六版
《生理学实验方法》李东亮主编
《麻醉生理学实验讲义》
《药理学》第六版
九 思考题
十,教研室审核意见 主任签字
51
低温对蛙心活动的影响
一 实验目的
1.学习离体蛙心灌流的实验方法.
2.观察Na+,K+,Ca2+三种离子及肾上腺素,乙酰胆碱等因素对心
脏活动的影响.
3.观察低温对蛙心活动的影响
二 实验原理
心脏的正常节律性活动需要一个适宜的内环境,内环境的变化
直接影响着心脏的正常活动.本实验在蛙心的灌流液内人为地加入一
些物质而改变心脏活动的内环境,观察心脏活动有何变化,之后,把
常温任氏液换成低温任氏液,观察低温对蛙心活动的影响.
各种因素对蛙心脏活动的影响
(1)0.65%NaCl溶液:111mmol/L,缺少Ca2+的溶液.
心肌细胞收缩依赖细胞外液的Ca2+浓度(呈正比),用0.65%NaCl
溶液灌注蛙心,由于缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位2期Ca2+内流
减少,胞浆Ca2+浓度降低,心肌的收缩活动随之减弱.如果长时间灌
注蛙心,心脏最终会停止收缩,但心肌仍能产生动作电位(兴奋),
这种现象称为兴奋-收缩脱耦联.对自律性影响不大,心率变化不大.
(2)2%CaCl2:180mmol/L(正常:2mmol/L)
工作细胞可见蛙心收缩力增强,但舒张不完全,以致收缩基线上移.
在Ca2+浓度较高的情况下,心脏会停止在收缩状态,这种现象称为"钙
僵"(只结合不解离的情况,Ca2+浓度在10-5M结合,10-7M解离).
在细胞膜上Na+与Ca2+的通透有竞争性抑制现象.
P细胞0期钙内流增加,去极速度增快(传导性好),4期自动除极速
度加快,自律性升高,心率加快.
(3)1%KCl:134mmol/L(正常:4mmol/L)
轻,中度高钾:细胞外K+浓度升高,细胞膜对K+的通透性升高,K+
与Ca2+通透性在细胞上有竞争性拮抗作用,因此,平台期缩短,Ca2
+内流减少,心肌的兴奋-收缩耦联过程减弱,心肌收缩力降低;膜内
外K+浓度梯度减少,静息电位绝对值减少,兴奋性升高;P细胞3
期钾通道失活速度减慢,导致4期自动去极速度减慢,同时K+外流
增加,最大复极电位的绝对值增大,自律性降低,心率减慢.
重度高钾:膜内外的K+浓度梯度减少,当膜电位达-55mv时,钠通
52
道失活,心肌的兴奋性完全丧失;同时Ca2+内流减少,心肌的兴奋-
收缩耦联过程减弱,心肌收缩力降低,停于舒张状态.
(4)1/万肾上腺素 属于体液因子,产生正性变时,变力,变传导作用.
变时:肾上腺素能增强跨膜内向If流,使4期自动去极速度加快,自
律性升高,心率加快;增强ICa通透性(0期L型,4期T型).
变力:肾上腺素与心肌细胞膜上的β受体结合,激活腺苷酸环化酶,
细胞内cAMP浓度升高,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,肌
浆中Ca2+浓度升高,收缩力增强;肾上腺素促进糖原分解,提供能
量;肾上腺素降低肌钙蛋白对Ca2+的亲和力,肌浆网钙泵对肌浆中
Ca2+回收加速,刺激Ca2+ -Na+交换,使细胞内Ca2+外排加快,加速
舒张过程.
变传导:结区细胞0期Ca2+内流加快,去极速度加快,幅度增大,
传导性增快.
(5)1/万乙酰胆碱 负性变时,变力,变传导作用.
乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,转而激活G蛋白,使钾通
道电导加强,增强K+外流,使细胞处于超极化状态,另一方面抑制
腺苷酸环化酶,钙通道关闭.
变时:P细胞复极过程中K+外流增快,引起最大复极电位的绝对值
增大;4期除极速度减慢,自律性降低,心率减慢.
变力:乙酰胆碱使K+外流增快,3期复极加速,Ca2+内流减少,收缩
力下降.
变传导:结区细胞0期Ca2+内流减少,去极速度减慢,幅度下降,
传导性下降,甚至出现传导阻滞.
(6)低温
低温使细胞代谢活动下降,能量消耗加大,心脏活动无论幅度,收缩强
度都有大幅度的下降.
三 实验对象 青蛙或蟾蜍
四 实验器材和药品
1.器材 生物信号采集系统,张力换能器,蛙类手术器械 1
套,蛙心插管,蛙心夹,试管夹,双凹夹,万能支架,滴管,150ml
小烧杯4个.
2.药品 任氏液,低温任氏液,O. 65%氯化钠,2%氯化钙,
1%氯化钾,1:10000肾上腺素,1:10000乙酰胆碱等.
53
五 实验步骤
(一)离体蛙心的制备
(1)取1只蟾蜍,破坏脑和脊髓,仰卧固定于蛙板上,用图钉固
定两前肢,用组织剪由剑突处向两锁骨肩峰端呈三角形剪开皮肤,再
剪开胸壁,用镊子提起心包膜,用眼科剪将其剪开,暴露心脏.
(2)在两个主动脉干下各穿两根细线(一根用来结扎腔静脉,另
一根用来结扎蛙心插管和主动脉).
(3)将心脏上翻,辨认心房,静脉窦,腔静脉,然后结扎腔静脉.
(4)用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一"v"型口.将盛
有少量任氏液的蛙心套管(用拇指将套管堵住,以防套管中的任氏液
流出)从"v"型口插入动脉圆锥,然后稍后撤套管,再将蛙心管尖端
转向蟾蜍的背侧及左下方,于心缩期插入心室内.观察管中液面随着
心室舒缩而上下波动,此时即用一根棉线将蛙心插管和左,右主动脉
结扎牢固,线的残端固定于插管壁的小钩上,防止插管滑出心室.
(5)小心提起套管以抬高心脏,用另一根棉线结扎腔静脉,结扎
线应尽量下压,以免伤及静脉窦.然后剪断主动脉左右分支及结扎线
下的腔静脉,将蛙心游离出来.
(6)吸去管内的血液,并用任氏液反复冲洗心室内的余血,以防
血液凝固而影响实验的进行.用连有细线的蛙心夹在心舒期夹住心尖
部.(心尖大,夹组织少,不易损伤心脏)
(二)实验装置
将蛙心插管用试管夹固定于支架上,蛙心夹的连线连接在机械换
能器上.打开计算机,进入"蛙心灌流"界面.调节实验参数,开始
记录心脏收缩曲线.
(三)观察项目
(1)记录心脏在仅有任氏液时的收缩曲线,观察心率及收缩幅度作为
正常对照.
(2)吸去管内的任氏液,换以等量0.65%Nacl,观察并记录心跳的变化,
之后换成低温任氏液,观察心跳的变化情况.
(3)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入2%Cacl 1―2滴,记
录观察心跳的变化,之后换成低温任氏液,观察心跳的变化情况.
(4)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入l%Kcl 1～2滴,记
录观察心跳的变化,之后换成低温任氏液,观察心跳的变化情况,.
54
(5)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入1：l0 000肾上腺素1～
2滴,记录并观察心跳的变化,之后换成低温任氏液,观察心跳的变
化情况.
(6)等量任氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入l：10 000乙酰胆碱1～
2滴,记录并观察心跳的变化,之后换成低温任氏液,观察心跳的变
化情况.
六 实验结果
任氏液0.65%NaCl2%CaCl21%KCl1/万E 1/万Ach
收缩
幅度 对照 ↓ ↑ ↓ ↑ ↓
收缩
频率 对照 -或↓ ↑ ↓ ↑ ↓
七 注意事项
1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦,操作要亲柔;心舒期一次
夹住蛙心尖,不宜夹多次,以免损伤心脏.
2.蛙心夹与换能器簧片的连线应呈一定的倾斜度,以防溶液滴
入换能器.
3.当各项实验效果明显后,应及时将插管内的溶液吸出,至少
用任氏液反复冲洗2～3次,并保持插管内液面高度不变,待心
跳恢复正常后,再进行下一项实验.
4.各种溶液的滴管应分开,不要混用.
5.在实验过程中,基线的位置,放大倍数,扫描速度一经调好
后不要再变动.
6.每一项实验,均应先记录一段正常对照曲线,然后再加入药
液并记录其效应.
55
低温麻醉对循环与呼吸功能的影响
一 实验目的:
学习人工低温模型的复制方法,深刻认识低温状态下机体循环与
呼吸功能的变化.
二 实验原理:
在全身麻醉状态下,人为地以屋里方法降低病人或实验动物体温
的方法称为低温麻醉.机体在低温状态下其生理功能发生一系列
复杂的变化,各系统机能活动趋向于抑制,如基础代谢下降,中
枢神经系统活动抑制,心脏传导系统受到明显抑制,血管张力降
低,肝脏功能下降,肾小球滤过作用降低,大部分内分泌腺活动
减弱,分泌量减少,但对缺氧耐受性增高等等.本实验通过记录
颈总动脉血压(颈总动脉插管法直接记录)和呼吸运动(通过剑
突-膈肌小片牵引法间接记录)来观察分析低温情况下机体循
环,呼吸功能的变化及其变化规律.
三 实验对象:家兔
四 实验器材和药品
电脑软件,压力换能器,拉力换能器,7151型点温度计,实
验槽,哺乳类动物手术器械一套,橡皮管,动脉夹,器官插管,
生理盐水,3%戊巴比妥钠,0.5%肝素生理盐水.
五 实验方法与步骤
(一) 实验记录装置的准备
(二) 手术准备
56
1. 动物麻醉,固定与剪毛
2. 游离剑突膈肌小片
3. 分离气管及一侧颈总动脉
4. 进行动脉插管,通过三通管记录动脉血压
5. 把小钩挂于剑突膈肌上,通过张力换能器记录呼吸运
动情况.
(三) 用 3%戊巴比妥钠进行低温麻醉,观察低温麻醉状态
下对机体呼吸和循环功能的影响.
五.实验结果
六.注意事项
57
实验课教案首页
新乡医学院生理与神经生物学教研室 2006.10.22
一 题目 肌松药对蛙坐骨神经腓肠肌的作用
二 对象 2004级麻醉专业
三 课时目
标与课时
分配
3.理论讲解1学时.
4.学生操作3学时.
四 授课重
点
坐骨神经腓肠肌的制备方法
五 授课难
点
1.标本收缩曲线解释
2.肌松药的作用机制
六 授课形
式
小班实验课
七 授课方
法与
课前准备
认真备课;
采用启发式教学;
围绕重点,难点,深入浅出;
八 参考书
《生理学》第六版
《生理学实验方法》李东亮主编
《麻醉生理学实验讲义》
《药理学》第六版
九 思考题
1.肌松药的作用机制
2.为什么在肌松药作用于肌肉初期,腓肠肌收缩幅度增加
十,教研室审核意
见
主任签字
58
肌松药对坐骨神经腓肠肌的作用
[实验目的]
1.掌握蛙类坐骨神经腓肠肌标本的制备方法
2.肌松药的作用机制
[实验原理]
青蛙和蟾蜍是两栖类动物,其生存环境较简单,离体组织器官所要求的条件
也较简单.坐骨神经和腓肠肌属于可兴奋组织,把它们置于人工配制的任氏液中
其兴奋性在几个小时内保持不变,若给坐骨神经一个适宜的刺激,可在神经上产
生一个可传导的动作电位,引起腓肠肌的一次收缩和舒张,表明神经和肌肉分别
兴奋了一次.一条坐骨神经干是由许多兴奋性不同的神经纤维所组成的,刚刚能
引起其中兴奋性最高的神经纤维产生兴奋的刺激强度即为这些神经纤维的阈强
度,具有此强度的刺激叫阈刺激,表现为受这些神经纤维支配的肌纤维发生收缩.
随着刺激强度的不断增加,有较多的神经纤维兴奋,肌肉的收缩反应也相应逐步
增大,强度超过阈值的刺激叫阈上刺激.当阈上刺激强度增大到某一值时,神经
中所有纤维均兴奋,此时肌肉做最大的收缩.再继续增强刺激强度,肌肉收缩反
应不再继续增大.具有引起肌肉最大收缩的最小刺激强度的刺激称为最适刺激.
用最适刺激以不同频率脉冲刺激神经时,若刺激频率较低,每次刺激的时间间隔
超过肌肉单次收缩的持续时间,则肌肉的反应表现为一连串的单收缩.若刺激频
率逐渐增加,刺激间隔逐渐缩短,肌肉的收缩反应可以融合,开始表现为不完全
强直收缩,以后成为完全强直收缩.
肌松药主要影响乙酰胆碱和受体的结合,从而达到肌松的目的.
[实验动物]蟾蜍
[实验器材和药品]
蛙类手术器械1套(包括粗剪刀1把,组织剪1把,眼科剪1把,探针1支,镊
子1把,锌铜弓1个,滴管2个,蛙板1个,玻璃皿1个,玻璃分针2支,手术
线若干,蛙钉2个),培养皿,铁架台,双凹夹,计算机,压力换能器,滴管,
污物缸,50ml烧杯2个,任氏液等
[实验步骤]
(一)制备坐骨神经-腓肠肌标本
1.破坏脑脊髓 取蟾蜍1只,以左手示指压其头部前端使其尽量前俯,中指与
环指夹住其前肢,拇指抵住其骶部,使整个躯干做最大屈曲,后肢悬空.把探针
自枕骨大孔处垂直刺入,到达椎管,即将探针改变方向刺入颅腔,向各侧不断搅
动,彻底捣毁脑组织;将探针退出至枕骨大孔处,转向后刺入椎管,捻动探针使
其逐渐刺入整个椎管内,完全捣毁脊髓.脑,脊髓完全破坏的标志:下颌呼吸运
59
动消失,疼痛反射消失,肌张力消失,尿失禁
2.去除头部和内脏
左手握住蟾蜍后肢,此时躯干上部及内脏即全部下垂.右手持粗剪刀在骶骼关节
前1cm处剪断脊柱,剪除全部躯干及内脏组织,注意勿损伤神经.
3.去皮
用圆头镊子夹住脊柱,注意不要碰到神经,捏住皮肤边缘,逐步向下牵拉剥
离皮肤.将全部皮肤剥除后,把标本置于盛有任氏液的培养皿中.
4.洗净双手和用过的全部手术器械
5.分离两后肢
避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半,再
从耻骨联合中央剪开两腿,将已分离的下肢标本浸入盛有任氏液的培养皿中保
存.
6.完成坐骨神经―腓肠肌标本
(1)游离坐骨神经:取出一下肢,用蛙钉固定于蛙板上,固定时要注意,坐骨神
经和腓肠肌朝上.先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部,然后循股二头肌
和半膜肌之间的坐骨神经沟,纵向分离暴露坐骨神经的大腿部分直至蝈窝,并将
坐骨神经从脊柱根部剪下(可连一小块脊椎骨).在分离过程中,把神经周围的结
缔组织去除干净,并把神经的细小分支剪断,但要注意不要用金属器械触碰神经,
也不要对神经过度牵拉,且应不断滴加任氏液使神经保持湿润.
(2)完成坐骨神经―腓肠肌标本:把游离的坐骨神经搭在腓肠肌上,在腓肠肌的
跟腱上穿线结扎,用组织剪在靠结扎线远端剪断跟腱.从膝关节周围开始剪
掉大腿所有的肌肉,用粗剪刀将股骨刮干净,然后在股骨中部剪去上段股骨
(留1.5cm长的股骨),沿膝关节剪去小腿(注意保留完整的腓肠肌).一个附
着在股骨上的腓肠肌并带有支配腓肠肌的坐骨神经的标本就完成了.
(3)检查标本的兴奋性:用任氏液湿润的锌铜弓迅速接触神经,如出现腓肠肌明显
而灵敏的收缩,则表示标本的兴奋性良好,即可将标本放在盛有任氏液的培
养皿中,以备实验之用.将另一下肢的坐骨神经―腓肠肌标本也依此法制备
出来.
(二)连接实验装置
(1)将机械换能器固定在铁支架上,腓肠肌的跟腱结扎线固定在换能器的簧片
上,此线不宜太紧或太松,并应与桌面垂直.
(2)将肌动器固定在铁架台的双凹夹上,且与换能器平行.把坐骨神经放在机动
器的刺激电极上,保持神经与刺激电极接触良好.并把标本中预留的股骨固定在
机动器上.
(3)打开机算机.激活生物信号采集实验操作系统,点击面板"实验项目"选"神
经肌肉实验".
[实验观察]
1.观察不同刺激强度对腓肠肌收缩的影响
选择"神经肌肉实验"中的"刺激强度与反应之间的关系''模式.选剧适当的
最初刺激强度.可以采用程控或非程控刺激方式,调节适当的刺激间隔,观察在
不同的刺激强度下肌肉收缩幅度的变化,并找出最小和最大刺激.
2.把沾有肌松药的滤纸片放在神经上,观察肌肉收缩情况.
60
3.把沾有肌松药的滤纸片放在肌肉上,观察肌肉收缩情况.
[实验结果]阈强度:0.05-0.10v
最适刺激强度:0.10-0.20v
不完全强直收缩最小频率:5-9hz
不完全强直收缩最小频率:10hz
[注意事项]
1.制备神经肌肉标本以及实验操作过程中,要不断滴加任氏液
2.操作过程中应避免强力牵拉和手捏神经或夹伤神经肌肉,以防标本干燥而丧
失活性
3:每次刺激之后必须让肌肉有一定的休息时间(0.5～1.0min)
4,如果肌肉在未给刺激时即出现挛缩,可能是由于仪器漏电或静电感应等原因
引起,应检查仪器接地是否良好
5,找准最大刺激强度,不能刺激过强而损伤神经.
6,仪器使用的参数可根据实际情况加以修正,以得到满意的结果.
[思考题]
1.用坐骨神经―腓肠肌标本可完成哪些方面的实验
2.如果单纯制作坐骨神经干标本,操作步骤与本实验操作有哪些不同
3.强直收缩在人体有何生理意义
4.肌肉发生强直收缩时,动作电位是否也发生融合
5.如果刺激直接施加在肌肉上会出现什么现象
61
实验课教案首页
新乡医学院生理与神经生物学教研室 2006.9. 10
一 题目 麻醉期间不良刺激对循环功能的影响
二 对象 2004级麻醉专业
三 课时目标
与
课时分配
5.理论讲解1学时.
6.学生操作3学时.
四 授课重点
家兔的基本操作
动脉插管的方法
五 授课难点
1.家兔的麻醉
2.仪器的操作
六 授课形式 小班实验课
七 授课方法
与
课前准备
认真备课;
采用启发式教学;
围绕重点,难点,深入浅出;
八 参考书
《生理学》第六版
《生理学实验方法》李东亮主编
《麻醉生理学实验讲义》
《药理学》第六版
九 思考题
1`.什么是不良刺激 在麻醉的过程中观察这些刺激对以后
的工作有什么意义
十,教研室审核意见 主任签字
62
麻醉期间不良刺激对循环功能的影响
【实验目的】 认识在麻醉情况下,一些不良刺激如窒息,压迫颈动脉窦区,气管插管,
腹腔内探察,大量失血等对呼吸与循环功能的影响,以利于麻醉期间更自觉,全面,有效地
维护呼吸与循环等功能的稳定.
【实验原理】 临床上常可见到病人在行气管插管或行腹腔内探察时,可引起明显的呼
吸与循环功能的紊乱,这可能是由于:在气管,支气管粘膜肠壁系膜上有丰富的迷走神经分
布且该部位对异物和牵拉刺激异常敏感.本实验模拟临床气管插管术及术中粗暴腹腔内探察
等不良刺激,观察其对呼吸和循环功能的影响,并探索消除不良影响的方法.
【实验动物】家兔
【实验器材】
压力换能器1,兔台,哺乳类动物手术器械一套,丝线,纱布,烧杯2,铁支架,双凹
夹2,动脉夹,"Y"型气管插管,动脉套管,注射器(5ml,2ml 各三个),生理盐水,3%戊
巴比妥钠,0.5%肝素生理盐水,塑料管(15cm),2%利多卡因,阿托品(0.5mg/支) .
【实验步骤】
一,实验准备
1,按实验四记录血压:将血压换能器与电脑相连,并将其固定于铁支架上,其位置大
致应平行于心脏水平面,然后将换能器一端开口夹闭,另一端与准备插入颈总动脉内的塑料
管相接,整个管道内要充满0.5%肝素生理盐水,备用.
2,家兔麻醉与固定:在兔耳缘静脉缓慢注射3%戊巴比妥钠(剂量30mg/Kg),将兔麻醉
后,将兔仰卧固定于兔台上,剪去颈部手术部位的兔毛.
3,记录颈总动脉内动脉血压:按实验四方法记录颈内动脉血压.
5,分离胸骨舌骨肌找出气管.气管下方穿线,在甲状软骨下方气管上作一倒"T"型切
口,插入气管插管后结扎固定.
4,腹正中切口暴露腹腔(可在观察项目1之间进行),沿腹正中线切开约3~5cm长切口,
再沿腹白线切开肌腱,腹膜而暴露腹腔,先用止血钳夹闭切口备用.
二,观察项目
1,气管内插管,观察血压变化.
2,气管内快速喷入2%利多卡因2ml后,于第5,10,15 min再进行气管插管,观察血
压变化.
3,阻塞呼吸道:堵住气管插管(15 s),
4,压迫颈动脉窦:用力压迫兔双侧下颌深部,观察血压改变.
5,腹腔探察:将肠管拉出腹腔外,观察血压变化.
6,从兔耳缘静脉同时注射1mg阿托品 ,观察血压和呼吸的变化,并于注射后第1,5,
8 min再进行同样腹腔探察,气管插管,观察血压变化.
63
7,待动物血压稳定后:
①经另一侧颈总动插入充满肝素的细塑料管,结扎固定.从该颈总动脉放血于注射器
内,放血量约占全血量的10%(全血量以约占体重的7%计算,),放血后立即夹闭颈总动脉.
观察并记录血压的变化.
②第二次放血:于第一次放血后5min,再打开右侧颈动脉夹放血,使血压降至30 mmHg
左右,于塑料插管内注入适量肝素,记录血压的变化.
③回输血液:于第二次放血后5min,自右侧颈动脉加压将放出之血液全部回输入兔体
内,再记录各项指标.
【结果】将实验结果列表记录.
动物 性别 体重 麻醉
不良刺激对兔循环功能的影响
气管
插管
给利多
卡因后气管插
管
5' 10'
15'
压迫颈
动脉窦
腹腔
探查
给阿托品
后腹腔探
查
1'
5' 8'
给阿托品
后气管插
管
1'
5' 8'
前
后
血压
(mmHg)
增加
放血及血液回输对血压的影响
第一次放血 第二次放血 血液回输
前
后
血压
(mmHg)
增加
【注意事项】
1,缓慢注射麻醉药,注意观察麻醉指标.
2,整个实验过程中保护好动脉插管处,防止血管刺破.
3,腹腔探察时注意刺激强度保持一致.
【实验报告与思考题】
记录上述各项结果,分析其原因.
64
新乡医学院理论课教案首页
课程名称:麻醉生理学实验 授课教师姓名及职称:贺丹 助教
一,题目 实验动物的基本操作
二,对象 2004级本科麻醉专业
三,单元教学
目标与课
时分配
1.理论讲解+试教 1学时
2.学生实验操作 3学时
四,授课重点
1. 分离血管,神经
2. 家兔颈总动脉插管
五,授课难点 软件的使用
六,授课形式 小班授课
七,授课方法
与课前准
备
1.做好预实验
2.认真备课,示教
3.启发教学+讨论
八,教材与参
考文献
1.《生理学》 第六版 姚泰主编
2.《药理学》 第五版 金有豫主编
3.《医学机能学实验》 第二版 刘巨源主编
4.《生理学实验方法》 李东亮主编
九,思考题
1.为何气管插管时斜面向下,插入气管后翻转 180o
后再固定
十,教研室审查意见
主任
签字
新乡医学院 生理学与神经生物学 教研室 2006年10月05日
动物实验的基本操作
一,机能学实验的概述:
器官组织水平的动物实验方法主要分为急性和慢性两大类.急性实验法又可分为离体组
织器官法和活体解剖法.如离体蛙心灌流即是离体组织器官法,如胃肠运动的直接观察即是活
体解剖法.急性生理实验持续时间短暂,条件简单,容易排除其他因素干扰,并有可能对研究
的对象进行直接的观察和细致的分析.动物实验后一般不能存活,也无须无菌条件.但所获得
的结果可能与正常生理机能相差较大,不能轻易推断.慢性生理实验通常先实施慢性生理手术,
在无菌条件下安置体内电极,安装瘘管或切除移植腺体等,待动物术后恢复时,再在机体清醒
完整的情况下进行记录,取样等实验项目.这类实验过程较长,实验室条件也要求较高,实验
动物模型也可使用较长时间,其机能活动更接近正常.每种方法都有它的长处,也都存在―定
的局限性,要了解并选择适当的方法,以与一定的研究目的和实验对象相适应.
二, 实验动物与实验用动物:
实验动物是根据科学研究的需要,定向培育而成的,供科学实验需要的对象和材料.它必
须有明确的生物学特征和清楚的遗传背景,并经微生物控制和特定环境下驯化培育.
实验用动物通常指用于实验的各种动物,它包括实验动物,家禽(畜)和野生动物.其中
一些实验动物可能出于某些受试动物敏感性或操作技术上的需要,但现阶段尚不可能完全达到
实验动物的实验要求.
三,常用器械的使用方法:
1.粗剪刀,组织剪,眼科剪
2.镊子
3.玻璃分针
四,实验动物基本操作00家兔
1.抓取:右手抓住其颈部皮肤,轻轻提起,左手迅速托拄其臀部
2.兔耳缘静脉麻醉
耳缘静脉位于耳背面外侧缘,拔去兔毛(用手轻弹,或用水湿润局部),使静脉血管充盈,
扩张,便于穿刺进针.左手拇指和无名指固定兔耳远端,食指和中指捏住近心端,右手持注射
器,以15 ~20 角刺入血管(尽量从远心端开始),当回抽有血或阻力小时,可推进注射器.
注意: 麻醉速度,剂量(氨基甲酸乙酯1g/kg),随时检查深浅反射.
3.固定:四肢夹于兔台四个兔夹上,细线挂其门牙固定头部.
4.颈部手术操作
⑴剪毛:粗剪刀压着皮肤,逆毛发生长放向剪,兔毛放置于盛水的兔毛缸内,剪毛区要大于手
术区.
⑵暴露气管:手扪及甲状软骨,用剪刀切开皮肤约6~7cm长(上起甲状软骨,下达胸骨上缘).
1
切开皮下,钝性分离肌肉,注意避开血管,以免造成大出血.
⑶气管插管:气管充分暴露后,穿线备用,在甲状软骨下第 3,4 环状软骨之间做一横形切口
(1/3-1/2 气管周长),再向上做一纵形切口,使成倒"T"字形.气管插管斜面向下,从切口
处向肺脏方向插入,用棉线结扎固定,并用线的残端扎于气管插管分叉处,以防脱落.
⑷分离血管,神经
左手食指及拇指捏住切口一侧皮肤,其余三指用力向上顶,在气管两侧暴露血管神经鞘.
血管神经鞘内有:颈总动脉
迷走神经:最粗大,银白色,位于外侧.
交感神经:稍细,位于内侧.
减压神经:最细,位于两者之间.
⑸动脉插管(用于测量血压,放血等)
a.分离足够长的颈总动脉(2-3cm),穿两根线备用.
b. 全身血液肝素化 0.3% 1ml/kg体重.
c. 结扎远心端,尽量靠头端.
d.用动脉夹夹闭近心端,尽量靠心脏端(结扎线距动脉夹应有2cm).
e.用眼科剪在尽可能靠近结扎线处,剪1/3-1/2血管周长的切口.
f.将充满抗凝剂(枸橼酸钠)的动脉插管插向心脏,在血管上结扎插管,并用线的残端结扎血
管外动脉插管.
g.松开动脉夹,可以放血或做其他操作.
5.处死
耳缘静脉注射空气(20-40ml)
BL-410生物信号采集处理系统
随着电子计算机技术在生物,医学领域的广泛应用,使原先不易进行的某些生物信息的检
测,变得简易可行.BL―410 生物信号采集处理系统就是一种配置在计算机上的智能化的四通
道生物信号采集,放大,显示,记录及数据处理系统.它具有记录仪,示波器,放大器,刺激
器和心电图仪等传统的机能实验常用仪器的全部功能,并且具有传统仪器所无法实现的数据分
析功能.此外,它还具有自动分析,参数预置,操作提示等功能.
一, 生物信号采集处理系统的原理
现代生物信号采集处理系统的基本原理是:首先将原始的生物机能信号,包括生物电信号和通
过传感器引入的生物非电信号进行放大,滤波等处理,然后对处理的信号通过模数转换进行数
字化,并将数字化后的生物机能信号传输到计算机内部,计算机则通过专用的生物信号采集处
理系统软件接收从生物信号放大,采集硬件传入的数字信号,然后对这些收到的信号进行实时
处理,一方面进行生物机能波形的显示,另一方面进行生物机能信号的实时存贮,另外,它还
可根据操作者的命令对数据进行指定的处理和分析.对于存贮在计算机内部的实验数据,生物
机能实验系统软件可以随时将其调出进行观察和分析,还可以将重要的实验波形和分析数据进
行打印.
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三.材料:1ml 注射器,小鼠灌胃器,鼠罩,动物天平,10%硫酸
镁溶液.
四.动物:小白鼠.
五.方法:
1.取体重相近小白鼠两只,称重(g),标记.
2.一只由大腿肌肉注射10%硫酸镁0.1ml/10g,另一只用相同
剂量灌胃并加生理盐水0.4ml.
3.观察比较两只小鼠反应有何不同.
六.注意事项:灌胃时避免插入气管.
七.分析:
硫酸镁可因给药途径不同而产生不同的药理作用.
口服:很少吸收,泻下,利胆;不易从胃肠道吸收,使肠内渗
透压升高,阻碍水分的吸收,肠内容积增大,刺激肠壁而呈导泻作
用.
外用热敷:消炎去肿;
注射:肌松,降压,中枢抑制,感觉及意识消失.(止痉,镇
静,降低颅内压)
肝脏功能对药物作用的影响
一.目的:观察肝功能损害对药物作用的影响.
二.原理:肝脏的功能:分泌,代谢,生物转化.
硫喷妥钠:静脉麻醉药,起效快,随剂量的增加,依次
61
新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:杨宇平 助教
基本内容
教学手段和
教学组织
产生抗焦虑,镇静,催眠,抗惊厥,麻醉作用.
三.材料:天平,1ml注射器,鼠罩,剪刀,0.4%硫喷妥钠溶液,
10%四氯化碳油剂(实验前24h皮下注射损伤肝脏).
四.动物:小白鼠.
五.方法:
1.取体重相近的健康小白鼠及已损害肝脏的小白鼠各1只,称
重,标记.
2.分别由腹腔注射 0.4%硫喷妥钠溶液 0.1ml/10g,记录并比
较两只小白鼠麻醉持续时间有何差别,并将结果记录如下.
(翻正反射)
3.处死解剖小鼠,观察肝脏有何不同.
六.结果:
体重
(g)
药量
(ml)
注射时
间
产生作
用时间
醒转时
间
维持时
间
肝脏
正常
暗红,柔软,
边缘锐,表面
光滑
肝损害
肿大苍白,脆,
边缘钝,颗粒
状
1.小白鼠的捉拿方法:右手抓住鼠尾,放在鼠罩上,用左手拇指及食
指延其背向前抓住其颈部皮肤,并以左手的小指和掌部夹住其尾固
定在手上.
2.小白鼠灌胃法:左手将小鼠固定,使其腹部朝上,右手持接有灌胃
针头的注射器,先从小鼠口角插入口腔内,然后用灌胃针头压其头
部,使口腔与食道成一直线,再将灌胃针头沿上腭壁轻轻进入食道,
观察药物作用维持
时间有何不同
进行示教,强调正
确的灌胃方法
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新乡医学院实验课教案
课程名称:医学机能学 授课教师姓名及职称:杨宇平 助教
基本内容
教学手段和
教学组织
灌胃针头进入大约 1/2~2/3 长度,如动物安静,呼吸无异常,可将
药液注入.如动物剧烈挣扎,则需退出重新进针,避免进入气管或
将食管,胃刺破.
3.小白鼠肌肉注射法:先将小鼠固定,将注射器的针头刺入小白鼠后
肢大腿外侧肌肉,再将药液注入.注射量:每腿一般0.2ml.
4.小白鼠腹腔注射法:左手握紧小鼠,将腹部朝上,注射部位在下腹
部腹白线的偏左或偏右侧,将针头取 30～50°角刺入皮下后,再向
前进针3～5mm,接着使注射器与皮肤面呈45°角刺入腹肌,有落空
感,回抽无血液,肠液即可注射药物.
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新乡医学院实验课教案首页(生理学)
课程名称:生理学实验 授课教师姓名及职称:白瑞樱
一,题目 去大脑僵直与去小脑动物的观察
二,对象 2005级本科各个专业
三,单元教学目标
与课时分配
1.理论讲解1学时:40min
2.学生操作4学时:160min
共:400min
四,授课重点 1. 去大脑僵直.
五,授课难点
1. 上,下丘之间完全横断脑干.
2. 小白鼠一侧小脑的破坏程度.
六,授课形式 小班实验课
七,授课方法与课
前准备
认真备课;
采用启发式教学;
了解学生已学课程,解剖学,神经生物学,同期课程生理学内容
围绕重点,难点,深入浅出
八,教材与参考文
献
《生理学实验方法》李东亮主编
《医用机能实验学》常全忠主编
九,思考题
1.什么是去大脑僵直 其产生机制如何
2.如果去大脑僵直现象不明显其可能原因是什么
3.大头针垂直刺入一侧小脑,进针深度的不同对小鼠的平衡功能有何
影响
十,教研室审查意见 主任签字
新乡医学院 生理学与神经生物学教研室 2007年 1月 10日
64
去大脑僵直与去小脑动物的观察
[实验目的]
1.观察去大脑僵直现象,了解高位中枢对肌紧张的调节作用.
2.观察动物的小脑损伤后对其肌紧张和身体平衡等躯体运动的影响.
[实验原理]
中枢神经系统对肌紧张性具有易化作用和抑制作用.正常情况下,易化区和抑制区活动在一定水平上
保持相对平衡,以维持正常的肌紧张.在动物的中脑上,下丘之间横断脑干时,脑干网状结构抑制区失去
了高位中枢的控制作用活动明显减弱,而易化区活动相对占优势,此时动物会出现四肢伸直,头尾昂起,
脊柱挺硬等伸肌过度紧张的现象,称为去大脑僵直.
小脑是调节机体姿势和躯体运动的重要中枢,它接受来自运动器官,平衡器官和大脑皮层运动区的信息,
其与大脑皮层运动区,脑干网状结构,脊髓和前庭器官等有广泛联系,对大脑皮层发动的随意运动起协调
作用,还可调节肌紧张和维持躯体平衡.小脑损伤后会发生躯体运动障碍,主要表现为躯体平衡失调,肌
张力增强或减退及共济失调.
[实验对象]
小白鼠和家兔
[实验器械和药品]
1.器材 动物手术器械一套,兔手术台,气管插管,颅骨钻,咬骨钳或骨锯,手术刀,手术线,棉花,纱
布;鼠手术台,注射针头,棉球,烧杯.
2.药品 20%氨基甲酸乙酯;乙醚.
[实验步骤]
(一)去大脑僵直
1.麻醉与固定动物
正确抓取家兔,称重,经耳缘静脉注射20%氨基甲酸乙酯(5ml/kg体重)进行麻醉,,俯卧固定在兔手
术台上.
2.颈部手术
(1) 剪去颈前部的被毛,做颈部正中切口,分离气管,插入气管插管,分离并结扎两侧颈总动脉,以减
少脑出血,方便于开颅手术.
(2) 翻转家兔,将其俯卧位固定在兔手术台上.
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及动物是否向一侧旋转或翻滚.
[实验结果分析]
[注意事项]
1.麻醉不能过深,以免影响结果.
2.在手术过程中,避免损伤矢状窦和冠状窦以防大出血.
3.熟悉兔脑的解剖结构.横断上,下丘时,应看准部位,切断水平不能过低以免损伤延髓呼吸中枢
造成呼吸停止而死亡.
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新乡医学院理论课教案首页
课程名称:生理学实验 授课教师姓名及职称:贺丹 助教
一,题目 坐骨神经腓肠肌实验
二,对象 2004级本科临床各专业
三,单元教 | |
